בהדמית vivo של יושרה סיבי עצב הראייה על ידי contrast-enhanced MRI בעכברים

בהתבסס על מבנה נוירו אנטומיים החיובי שלה מערכת הראייה המכרסם מציעה אפשרויות ייחודיות כדי להעריך תרכובות תרופתי ויכולתם לתווך neuroprotection ¹ או השפעות פרו משובי ^2,3. יתר על כן, היא מאפשרת מחקרים על המאפיינים הפונקציונליים ונוירו האנטומי של מוטנטים עכבר, כפי שהודגם לאחרונה לעכברים חסרים את חלבון פיגומי presynaptic ⁴ בסון. יתר על כן, מגוון רחב של כלים משלימים מקנה נוסף שמציעה של תאים ברשתית גנגליון (RGC) ומספרי האקסון RGC, כמו גם פעילות RGC, למשל, על ידי electroretinography ובדיקות התנהגותיות, והנחישות של שחלופים בקליפת המוח על ידי הדמיה אופטית של אותות פנימיים. ההתפתחויות טכניות האחרונות במיקרוסקופ לייזר תאפשר בהדמיה באתרו של התחדשות RGC ידי דימות פלואורסצנטי רקמות העמוקה בדגימות הר שלמות של עצב ראייה (ON) ומוח. בhistolog זהגישת iCal, סליקת רקמת tetrahydrofuran מבוססת בשילוב עם מיקרוסקופ פלואורסצנטי גיליון האור מאפשרת רזולוציה של סיבים יחיד שמחדש להיכנס לON deafferented והדרכים אופטיות ^5. בעוד טכניקות כזה עשויות להיות מעולה ברזולוציה וקביעת דפוסי צמיחה, הם לא יאפשר לניתוחים חוזרים ואורכים של אירועי צמיחה בודדים, שבעיקר הם רצויים להעריך את התהליך של התחדשות לטווח ארוך.

MRI ניגודיות משופרת כבר מועסק להדמיה פולשנית המינימלית של הקרנת retino-tectal בעכברים ובחולדות ^6,7. זו יכולה להיות מושגת על ידי משלוח תוך עיני ישיר של יוני פאראמגנטיים (למשל, Mn ^{2 +)} לתאי רשתית. כאנלוגי סידן, Mn ^{2 +} הוא שולב somata RGC דרך ערוצי סידן תלוי מתח ומועברים באופן פעיל לאורך שלד תא אקסון של ON שלם ומערכת ראייה. בזמן שהוא מצטבר בגרעין המוחשל ההשלכה החזותית, כלומר הגרעין לרוחב הברכיתיים (LGN) וcolliculus מעולה (SC), התפשטות transsynaptic לקליפת הראייה העיקרית מופיעה זניחה ^8,9, למרות שהיא עשויה להתרחש ^10,11. תחת רצף MR, פאראמגנטיים Mn ^{2 +} מרחיב ניגוד MR בעיקר על ידי קיצור T ספין סריג זמן רגיעה ₁ ^12. כגון Mn ^{2 +} משופר MRI (ממר"י) כבר מיושם בהצלחה במחקרים שונים נוירו אנטומיות ותפקודיים של חולדות, כוללים ההערכה של התחדשות אקסון והתנוונות לאחר פציעת ON ^13,14, המיפוי האנטומי המדויק של ¹⁵ הקרנת retino-tectal , כמו גם קביעת מאפייני תחבורת אקסון לאחר טיפול תרופתי ^16. החידודים אחרונים במינון, רעיל, וקינטיקה של פרוטוקולי MRI עצביים Mn ² ספיגות והובלה ^+, כמו גם שיפור בהרחיבו את היישום שלה ללימודים במהונדסיםעכברים ⁹ באמצעות 3 סורקי טסלה בשימוש נפוץ בפרקטיקה קלינית ^17.

כאן, אנו מציגים פרוטוקול ממר"י מתאים לאורכים בתחום ההדמיה vivo של הקרנת retino-tectal העכבר ומדגימים את תחולתה על ידי הערכת Mn ^{2 +} שיפור אות תלוי בתנאי ניוון מוחיים נאיביים ושונים. הפרוטוקול שלנו שם דגש ספציפי על רכישת נתונים MR בשדה מתון 3 T מגנטי שהוא בדרך כלל נגיש יותר מסורקי חיה ייעודיים. בעכברים נאיביים, אנו ממחישים כיצד עוצמת אות בדרכי ספציפיות יכולה להיות משמעותי וreproducibly להיות מוגבר לאחר הזגוגית (ivit) Mn ^{2 +} יישום. כמותית, Mn ^{2 +} התפשטות לאורך ההקרנה החזותית מתרחשת באופן עצמאי של התהליך הנורמלי ההזדקנות (נמדד בין עכברים בן 3 ו26 חודש) וההגדלה היא עקשן לגירוי ויזואלי והסתגלות לחשכה. לעומת זאת, Mn <sעד> 2 + העשרה במרכזי thalamic והמוח התיכונים היא פחתה הבא חריף על פגיעה למחוץ ¹⁸ כמו גם בעכברים עקום החוצה nfkb1 (p50 ^KO) הסובל ממות RGC אפופטוטיים ספונטני ועל ניוון ^19. כך, בהרחבה לניתוח היסטולוגית קונבנציונלי, ניתוח ממר"י אורך של בעלי חיים בודדים מאפשר אפיון של קינטיקה הייחודית של תהליכי ניוון עצבי. זה צריך להיות שימושי עבור מחקרים על neuroprotection והתחדשות אקסון קשורים התערבויות תרופתיים או גנטיות.