Biomarcadores são indicadores biológicos diretamente-medidos de doença ou de saúde. Na população e as ciências sociais, os biomarcadores precisa ser de fácil obtenção, transporte e analisar. Secas mancha de sangue (DBS) coleção atende a essa necessidade, podem ser coletadas no campo com altas taxas de resposta e analisados para uma variedade de biomarcadores.
Biomarcadores são indicadores biológicos diretamente-medidos de doença, saúde, exposições, ou outra informação biológica. Na população e as ciências sociais, os biomarcadores precisa ser de fácil obtenção, transporte e analisar. Manchas de sangue seco atender a essa necessidade, e podem ser coletadas no campo com altas taxas de resposta. Estes elementos são particularmente importantes em projetos de estudo longitudinal, incluindo intervenções onde o atrito é fundamental para evitar, e altas taxas de resposta melhorar a interpretação dos resultados. Coleção secas amostra mancha de sangue é simples, rápido e relativamente indolor, menos invasiva, em seguida, a punção venosa, e exige requisitos de armazenamento campo mínimos (ou seja, as amostras não precisam ser imediatamente congelado e pode ser armazenado por um longo período de tempo em um ambiente estável congelador antes ensaio). As amostras podem ser analisadas para uma variedade de diferentes analitos, incluindo o colesterol, a proteína C-reactiva, a hemoglobina glicosilada, numerosas citocinas, e outras analitos, bem como fornecer material genético. Recolha DBS é descrito como empregada em diversos estudos recentes.
Biomarcadores podem fornecer informações valiosas sobre os processos biológicos que variam de normal a patogênica que pode contribuir para a doença clinicamente identificável 1. Em ambientes de pesquisa, manchas de sangue seco (DBS) estão se tornando cada vez mais preferido para punção venosa como um método para coleta de biomarcadores no sangue total. Recolha DBS é simples, relativamente fácil, menos invasiva, em seguida, a punção venosa, e requer o mínimo de requisitos de armazenamento (isto é, as amostras não precisam de ser imediatamente congelados e pode ser armazenado durante um longo período de tempo em um ambiente estável congelador antes do ensaio). Amostras DBS pode ser testado para uma variedade de diferentes analitos, incluindo o colesterol, a proteína C-reactiva, a hemoglobina glicosilada, anticorpos contra o vírus de Epstein-Barr, e diversas citoquinas.
Punção venosa tem sido o padrão-ouro para a coleção de biomarcadores no sangue. No entanto, a obtenção, armazenamento e transporte de amostras de sangue requer aderênciasce a uma série de protocolos e códigos de saúde, que pode não ser possível em certos protocolos de pesquisa. Flebotomistas deve ser oficialmente certificadas para a punção venosa, enquanto procedimentos de amostragem de DBS são mais simples e não necessitam de certificação oficial. Coleta de sangue venoso também exige mais equipamentos do que a coleção DBS (ou seja, agulhas, tubos, torniquetes), e mais esforço de pós-colheita. Punção venosa devem ser processados (por exemplo, soro ou plasma extraído a partir da amostra de sangue através de centrifugação ou de repousar à temperatura ambiente durante um determinado período de tempo) e congelados entre -20 ° C e -70 ° C imediatamente a fim de evitar a degradação dos analitos , enquanto que as amostras de DBS deve simplesmente ser deixada secar ao ar e, em seguida, pode ser armazenada à temperatura ambiente durante uma semana ou mais, dependendo de o analito, antes da transferência para um congelador 2. Amostras DBS são menos caros do que para coletar amostras de punção venosa, por razões descritas acima. Amostras DBS tambémocupam menos espaço, reduzindo os custos de transporte e armazenamento antes do ensaio.
O uso de saliva como biomarcador tornou-se fundamental em estudos biobehavioral. Saliva oferece um método simples, não invasivo para coletar biomarcadores e tornou-se o padrão para o trabalho de campo que visa medir o cortisol ou cotinina 3-5. A urina é outra amostra que podem ser recolhidos de forma não invasiva e podem ser utilizados em estudos de nível de população para ensaios de melatonina ou de toxicologia. Embora ambos urina e saliva oferecer para a frente os procedimentos de coleta que são capazes de ser concluída pelos próprios participantes, nem todos os analitos pode ser medida em estes meios.
DBS oferece uma simples e de baixo custo, alternativa para punção venosa e estão se tornando cada vez mais uma ferramenta de pesquisa implementado no campo e estudos populacionais 6.
Biomarcadores são ferramentas extremamente úteis em várias disciplinas, como medicina, biologia celular, genética, psicologia, sociologia, demografia e epidemiologia social. Dentro de cada disciplina, validade e confiabilidade fase inicial de pesquisa de biomarcadores foi usado para descobrir tanto o risco de doença oculta e fornecer previsão longitudinal dos resultados de saúde. Nestes casos, os biomarcadores que são precisas e durável (isto é, podem sobreviver ao desfasamento entre a recolha da amostra e a execução do ensaio de laboratório para extrair o biomarcador), e versátil (isto é, útil em uma variedade de modelos) são necessários.
Enquanto coleção DBS é um procedimento relativamente simples, várias técnicas podem ajudar a maximizar o volume de pontos coletados. Antes da coleta começa, garantindo a mão de um participante é quente e, portanto, que os vasos sanguíneos se dilatam, vai ajudar o fluxo de sangue uma vez que o dedo está perfurado. Usando aquecedores de mão ou ter umparticipante executar suas mãos em água morna pode ajudar com este processo. Ordenhar o dedo antes da coleta de sangue vai puxar a ponta do dedo e aquecer a mão para ajudar o fluxo sanguíneo. A ordenha é um processo que melhora com a prática. Os coletores devem usar qualquer técnica que achar mais confortável e eficaz, mas a abordagem mais comum envolve a ordenha manual do participante com a mão em frente ao colecionador. Este método permitirá que o polegar do coletor de trabalhar em profundidade palma do participante, enquanto a mão oposta pode estabilizar o pulso do participante. Como exemplo, se um estavam coletando sangue de um dedo na mão esquerda do participante, o coletor seria estabilizar o pulso do participante com a sua mão esquerda e leite com a mão direita. Erros comuns cometidos durante a ordenha não incluem o uso de um aperto firme, puxando a pele acima da mão, em vez de trabalho para os músculos para puxar o sangue para a ponta dos dedos. É também importante para evitar pinoching o dedo com a mão ordenha ou segurando firmemente o pulso do participante com a mão nonmilking, os quais impedem o fluxo sanguíneo.
Ao perfurar a dedo, fazer a punção o mais profundamente possível, pressionando firmemente a lanceta no dedo antes da alta. Uma punção superficial resulta em menor fluxo de sangue e de coagulação mais rápido. Após a perfuração do dedo, trabalhando rapidamente é fundamental. Fina sangue leva a mais fácil coleta e manchas maiores. Após a punção, o sangue torna-se mais e mais viscoso até coagulação. Quanto menos tempo necessário para coletar as manchas de sangue no cartão, maior o seu volume.
O ideal é o sangue do participante será suficiente fina que cai vai cair de seu próprio peso, mas isso não será o caso para todos os participantes, como o sangue de algumas pessoas é mais grosso ou coágulos mais rápido do que outros. Se o sangue é muito grosso para cair do dedo, o cartão de filtro deve ser trazido para o sangue para a coleção. When trazer o cartão para o sangue é importante para manter o cartão em contacto com a gota, enquanto ele está pendurado a partir do dedo durante o tempo possível, em vez de apenas limpando o sangue para o cartão. Isto irá ajudar a puxar o sangue do dedo para maximizar o tamanho da mancha. Esta técnica requer mãos firmes para manter contato entre o sangue eo cartão. Com as duas mãos, uma para segurar a mão participantes e um para segurar o cartão, e mantendo as duas mãos em contacto uns com os outros ajuda a estabilizar o cartão eo sangue juntos.
Áreas de pesquisa avançadas, tais como a avaliação de risco cardiometabólico, há muito tempo invocado biomarcadores, como a proteína C-reativa (PCR), insulina e hemoglobina glicosilada (HbA1C) para a detecção precoce dos riscos e os esforços de prevenção, bem como biomarcadores de "endpoints rígidos" para a doença cardiovascular (DCV) e mortalidade associada à doença cardiovascular 12. Epidemiologia clínica freqüentemente avalia biomarcadores para prospectively prever resultados de risco cardiometabólico, como doença cardíaca e diabetes tipo II. Talvez o mais utilizado de todos os biomarcadores é o escore de risco de Framingham, um composto que inclui a pressão arterial, os níveis de colesterol HDL e os níveis totais de cholesterols que demonstrou utilidade na previsão de DCV 13. No entanto, o escore de Framingham tem experimentado algumas controvérsias técnicas, e tem limitações em estudos voltados para ligar os fatores sociais e ambientais para a saúde, o que sugere a necessidade de biomarcadores mais precisos e específicos relacionados com a investigação cardiovascular.
Há um número de kits disponíveis comercialmente utilizando técnicas de ELISA ou similares disponíveis para o ensaio de amostras de DBS. Necessária para o ensaio de amostras de DBS são o uso de etapas específicas e optimizadas de eluição para levar as amostras secas em solução 2. Esta é uma área em expansão de investigação como ensaios para mais analitos estão sendo desenvolvidos atualmente 1. Entre ªe ensaios já validados e sendo amplamente utilizados são o colesterol 2, CRP 10,14,15, IgE16, EBV 9,15, a leptina 17 e cyotkines 18. Há uma série de laboratórios especializados na análise de DBS, incluindo a Universidade de Washington Departamento de Medicina Laboratorial (UW Lab Med) Biomarcador Laboratory (Diretor: Mark Wener).
Tendo em conta que um painel de biomarcadores, ao invés de um biomarcador solitário, é mais útil nas áreas de pesquisa cardiovascular e diabetes, os biomarcadores devem ser considerados, juntamente com uma variedade de fatores contextuais, a fim de maximizar a sua utilidade. Pesquisa de biomarcadores pode ser caro no entanto, tanto financeiramente como no tempo de coleta de dados. Assim, embora seja vital para escolher biomarcadores que são precisas, durável e versátil, o trabalho ea família investigação biomarcador deve estar radicado na praticidade, selecionando biomarcadores que são de baixo custo, apropriado e pode ser recolhida rapidamente wiª facilidade. Além disso, considerações de ordem prática, muitas vezes resultar em uma incapacidade de maximizar simultaneamente preço, qualidade e velocidade dentro de um procedimento. Aqui encontram-se os próximos passos na pesquisa de biomarcadores de saúde dentro de estudos de campo e da população. O campo de pesquisa de biomarcadores está atualmente em um período de forte crescimento, no entanto, a maior parte do trabalho ainda está por vir.
The authors have nothing to disclose.
Este trabalho foi apoiado pelo Trabalho, Família e Rede de Saúde (www.WorkFamilyHealthNetwork.org), que é financiado por um acordo de cooperação com os Institutos Nacionais de Saúde e os Centros de Controle e Prevenção de Doenças: Eunice Kennedy Shriver National Institute of Child Health e Desenvolvimento Humano (Grant # U01HD051217, U01HD051218, U01HD051256, U01HD051276), do Instituto Nacional do Envelhecimento (Grant # U01AG027669), Secretaria de Ciências Comportamentais e Science Research, National Heart, Lung and Blood Institute (R01HL107240) e Instituto Nacional de Segurança Segurança e Saúde (Grant # U01OH008788, U01HD059773). Bolsas do William T. Grant Foundation, Alfred Sloan Foundation P, ea Administração para Crianças e Famílias têm fornecido financiamento adicional. O conteúdo desta publicação é de responsabilidade exclusiva de seus autores e não representam necessariamente a posição oficial dos institutos e escritórios.
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