Fare Kısa ve Uzun Vadeli Lokomotor Aktivite video Takip Yazılımı ile Analiz
Summary
Lokomotor aktivite (LMA) farelerde davranış basit ve kolay uygulanabilir bir ölçüsüdür. Video izleme yazılımı (VTS) ve LMA Kaplin LMA analizi manuel, çizgi geçiş yöntemi ile karşılaştırıldığında, özellikle, özgüllük ve duyarlılık geliştirilmesi için izin verir. Ayrıca VTS fare LMA uzun vadeli izleme sağlar.
Abstract
Lokomotor aktivite (LMA) fare ve diğer kemirgenler davranış basit ve kolay uygulanabilir bir ölçüsüdür. Video izleme yazılımı (VTS) gelişmeler bu manuel puanlama ile hat geçişi yöntemi ile karşılaştırıldığında önemli ölçüde özgüllük ve duyarlılığı geliştirmek, LMA test birleştiğinde izin var. Buna ek olarak, VTS yüksek verimli bir deney sağlar. Açık alan testi (OFT) için kullanılan Otomatik film izleme benzer, LMA test benzersiz olmasına rağmen bu bu fareler kendi kafes içinde kalmasını sağlar ve ışık-karanlık aktif aşamasında parlak aydınlatma anksiyojenik uyarıcı kullanmak değildir döngüsü. Artık hareket çalışmaları (saat-gün) sık kullanılan vericileri ve biyotelemetri implante varken Geleneksel olarak, LMA, zaman (dakika) kısa bir süre için kullanılmıştır. Gerçek zamanlı izleme seçeneği ile, uzun, kısa vadeli LMA test gibi, şimdi çekmesi kullanılarak yapılabilir. Uzun vadeli LMA testler, uzman gerektirir, Ancak gıda ve su (ki genellikle kafes üzerine konumlandırılmış) video çekmesi engel olmadığını bu kadar kolay, kafes inşa. Önemlisi, videografisi ve VTS zor veya çizgi geçme ve / veya biyotelemetri ile ölçmek olanaksız olan bu tür fare hareket yolu gibi parametrelerin, miktarının sağlar. Özetle, VTS için birleştiğinde LMA test fare hareketi bir daha eksiksiz bir açıklaması ve uzun bir süre boyunca hareket incelemek yeteneği tanıyor.
Protocol
Representative Results
Discussion
Farelerde hastalık belirtileri uyuşukluk, sosyal ve çevresel ortamda ilgi kaybı, halsizlik ve iştahsızlık 2-3 içerir. Farenin ve kemirgenlerde, LMA immün aktivasyon 4-5 sonra hastalık değerlendirmek için de kullanılabilir. Ayrıca, uzun vadeli LMA sirkadiyen davranış veya uyku / uyanıklık desen bozuklukları tedavi bağlı değişiklikler analizi sağlayan 24 saat (veya daha büyük) süre içinde hareketini takip olanağı sunar. Bu non-invaziv, kolayca tekrar ölçü veya sürekl…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Destek: Bu araştırma, Ulusal Sağlık Enstitüleri (DK064862, NS058525 ve GGF için AA019357) tarafından desteklenmiştir.
Materials
| Name of Reagent/Material | Company | Catalog Number | Comments |
| Video camera | Sony | HDR-XR500V | Other, similar video cameras may work as well. The file storage format (codec/container) must be compatible with the VTS used. It is recommended when initially establishing a VTS to choose the VTS first and work with the vendor in choosing an appropriate camera, especially with respects to file format and video resolution compatibility. |
| Opaque cage dividers | Custom fabricated based on specific cage dimensions. To facilitate image analysis, dividers should be of a similar color to the cage bedding. Structurally fixed dividers are preferrable because they speed setup between multi-mice experiments, such as those involving repeated measurements. Sturdy transportable cage dividers can be constructed of 1/2 inch opaque plastic and joined via a series of cross laps. | ||
| Light or Dark bedding (opposite of mouse coat color) | Available from several laboratory animal supply distributors, depending on location. | ||
| Clear Plexiglas cage tops | Custom fabricated based on cage dimensions. | ||
| Automated video tracking software (EthoVision XT 7) | Noldus Information Technology | A variety of VTS manufacturers exist, use of other software may suffice. | |
| PC | Dell Inc. | See VTS software providers minimum PC .requirements | |
| White noise generator | Dohm | DS | A variety of white noise generators are available, depending on need. |
| Brooder clamp lights with red light bulbs | Several sizes and styles available. Number required depends on room size/lighting needs. Do not exceed 125 lumens in the testing room. | ||
| Lab bench or butcher paper | Paper should match or be very similar in color to the cage bedding. |
References
- Goulding, E. H., Schenk, A. K., Juneja, P., MacKay, A. W., Wade, J. M., Tecott, L. H. A robust automated system elucidates mouse home cage behavioral structure. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 105, 20575-20582 (2008).
- Kent, S., Bluthé, R. M., Kelley, K. W., Dantzer, R. Sickness behavior as a new target for drug development. Trends Pharmacol. Sci. 13, 24-28 (1992).
- Dantzer, R. Cytokine, sickness behavior, and depression. Immunol. Allergy Clin. North Am. 29, 247-264 (2009).
- Godbout, J. P., et al. Exaggerated neuroinflammation and sickness behavior in aged mice following activation of the peripheral innate immune system. FASEB J. 19, 1329-1331 (2005).
- York, J. M., et al. The biobehavioral and neuroimmune impact of low-dose ionizing radiation. Brain Behav. Immun. 26, 218-227 (2012).
- York, J. M., et al. Individually ventilated cages cause chronic low-grade hypoxia impacting mice hematologically and behaviorally. Brain Behav. Immun. 26, 951-958 (2012).
- Jennings, M., et al. Refining rodent husbandry: the mouse. Report of the Rodent Refinement Working Party. Lab. Anim. 32, 233-259 (1998).
- York, J. M., Blevins, N. A., Baynard, T., Freund, G. G. Mouse testing methods in psychoneuroimmunology. Methods in Molecular Biology. 934, 243-276 (2012).
- Dantzer, R., O’Connor, J. C., Freund, G. G., Johnson, R. W., Kelley, K. W. From inflammation to sickness and depression: when the immune system subjugates the brain. Nat. Rev. Neurosci. 9, 46-56 (2008).
- Crawley, J. N. Behavioral phenotyping of rodents. Comp. Med. 53, 140-146 (2003).
- Karelina, K., et al. Social isolation alters neuroinflammatory response to stroke. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 106, 5895-5900 (2009).
