Измерение Тактильная аллодиния в мышиной модели бактериальный простатит
Summary
Инфицирование предстательной железы может быть фактором в посредничестве тазовой боли при хроническом простатите. Мы описываем порядок подготовки стандартизированных бактериальной посевной, инстилляции бактерий в мочеиспускательный канал самцов мышей и методологии для измерения тактильной аллодинии у мышей с течением времени.
Abstract
Uropathogenic кишечной палочки (УПЭК) являются патогенные микроорганизмы, которые играют важную роль в инфекции мочевыводящих путей и бактериальный простатит 1. Недавно мы показали, что УПЭК играют важную роль в инициировании хронической тазовой боли 2, особенностью хронического простатита / синдрома хронической тазовой боли (CP / CPPS) 3,4. Инфекция простаты клинически значимых УПЭК могут инициировать и установить хронических болей с помощью механизмов, которые могут включать повреждения тканей и начала механизмы аутоиммунных 5.
Задача для понимания патогенеза УПЭК в предстательной железе является относительной недоступности предстательной железы манипуляции. Мы использовали ранее описанный метод внутримочеиспускательные инфекции от 6 до доставки клинического штамма УПЭК в самцах мышей таким образом устанавливая восходящей инфекции предстательной железы. Здесь мы описываем наши протоколы для стандартизации баcterial посевной 7, а также процедура катетеризации наркозом мышей-самцов для закапывания бактерий.
CP / CPPS в первую очередь характеризуется наличием тактильной аллодинии 4. Поведение тестирование на основе концепции кожной гипералгезии в результате упомянутых висцерального 8-10 боли. Раздражительным фокус в висцеральных тканях снижает болевой порог кожной позволяет преувеличенной реакции на нормально не болезненные раздражители (аллодиния). Применение нормальной силы на кожу приводит к ненормальной реакции, которые имеют тенденцию к увеличению с интенсивностью основного висцеральной боли. Мы описываем методологию в NOD / ShiLtJ мышей, которые используют Фрея волокон количественно тактильной аллодинии с течением времени в ответ на одну инфекцию УПЭК бактерий.
Protocol
Representative Results
Discussion
Инфекция простаты мыши с УПЭК позволяет в естественных условиях моделирования событий, которые могут быть задействованы в патогенезе бактериального простатита, CP / CPPS или предрасполагающие события в хроническое воспаление. Методов, описанных для бактериального препарата и зака?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Это исследование было поддержано грантом 1K01DK079019A2 (PT) от NIH / NIDDK.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number |
| Culture tubes | BD Falcon | 352059 |
| LB Broth Miller | EMD | EM1.10285.0500 |
| Nalgene Centrifuge Tubes | Thermo | 3118-0050 |
| Isoflurane | Butler Schein | NDC 11695-6776-1 |
| Catheter needle 30G | Hamilton | 91030 |
| PE10 tubing | BD intramedic | 427400 |
| Von Frey Filaments | Stoelting | 58025-31 |
References
- Yamamoto, S. Molecular epidemiology of uropathogenic Escherichia coli. Journal of infection and chemotherapy official journal of the Japan Society of Chemotherapy. 13, 68-73 (2007).
- Rudick, C. N., et al. Uropathogenic Escherichia coli induces chronic pelvic pain. Infect. Immun. 79, 628-635 (2011).
- Pontari, M. A., Ruggieri, M. R. Mechanisms in prostatitis/chronic pelvic pain syndrome. The Journal of urology. 172, 839-845 (2004).
- Schaeffer, A. J. Clinical practice. Chronic prostatitis and the chronic pelvic pain syndrome. The New England journal of medicine. 355, 1690-1698 (2006).
- Rudick, C. N., Schaeffer, A. J., Thumbikat, P. Experimental autoimmune prostatitis induces chronic pelvic pain. American journal of physiology. Regulatory, integrative and comparative physiology. 294, R1268-R1275 (2008).
- Elkahwaji, J. E., Ott, C. J., Janda, L. M., Hopkins, W. J. Mouse model for acute bacterial prostatitis in genetically distinct inbred strains. Urology. 66, 883-887 (2005).
- Hultgren, S. J., Porter, T. N., Schaeffer, A. J., Duncan, J. L. Role of type 1 pili and effects of phase variation on lower urinary tract infections produced by Escherichia coli. Infect. Immun. 50, 370-377 (1985).
- Jarrell, J., Giamberardino, M. A., Robert, M., Nasr-Esfahani, M. Bedside testing for chronic pelvic pain: discriminating visceral from somatic pain. Pain research and treatment. 2011, 692102 (2011).
- Jarrell, J. Demonstration of Cutaneous Allodynia in Association with Chronic Pelvic Pain. J. Vis. Exp. (28), e1232 (2009).
- Giamberardino, M. A., et al. Viscero-visceral hyperalgesia: characterization in different clinical models. Pain. 151, 307-322 (2010).
- Laird, J. M., Martinez-Caro, L., Garcia-Nicas, E., Cervero, F. A new model of visceral pain and referred hyperalgesia in the mouse. Pain. 92, 335-342 (2001).
- Laird, J. M., Souslova, V., Wood, J. N., Cervero, F. Deficits in visceral pain and referred hyperalgesia in Nav1.8 (SNS/PN3)-null mice. J. Neurosci. 22, 8352-8356 (2002).
- Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw. Journal of neuroscience. 53, 55-63 (1994).
- Schaeffer, A. J., Schwan, W. R., Hultgren, S. J., Duncan, J. L. Relationship of type 1 pilus expression in Escherichia coli to ascending urinary tract infections in mice. Infect. Immun. 55, 373-380 (1987).
- Boehm, B. J., Colopy, S. A., Jerde, T. J., Loftus, C. J., Bushman, W. Acute bacterial inflammation of the mouse prostate. The Prostate. 72, 307-317 (2012).
- Rivero, V. E., Cailleau, C., Depiante-Depaoli, M., Riera, C. M., Carnaud, C. Non-obese diabetic (NOD) mice are genetically susceptible to experimental autoimmune prostatitis (EAP). Journal of autoimmunity. 11, 603-610 (1998).
- Pakarainen, T., Zhang, F. P., Makela, S., Poutanen, M., Huhtaniemi, I. Testosterone replacement therapy induces spermatogenesis and partially restores fertility in luteinizing hormone receptor knockout mice. Endocrinology. 146, 596-606 (2005).
- Taguchi, O., Kojima, A., Nishizuka, Y. Experimental autoimmune prostatitis after neonatal thymectomy in the mouse. Clinical and experimental immunology. 60, 123-129 (1985).
