Burada bir büyüme tahlil tarif<em> Staphylococcus aureus</em> Mevcut besin demir tek kaynak olarak hemoglobin kullanarak. Bu testte elde edilen hemoglobin demir elde etme ile ilgili bakteri faktörlerin rolü kurar.
S. aureus hayati metabolik fonksiyonları ve hastalık yapan yürütmek için demir gerektiren bir patojen bakteridir. Insan konak içindeki demirin en bol rezervuar hemoglobin kofaktörüdür heme vardır. Hemoglobin demir elde etmek için, S. aureus demir-regüle yüzey belirleyicisi (Isd) sistemi 1 olarak bilinen karmaşık bir sistem kullanır. Isd sistem ilk bind konak hemoglobin Bileşenleri, daha sonra ayıklamak ve heme ithalat ve nihayet bakteriyel sitoplazma 2,3 heme demir kurtarmak. Bu yol vitro çalışmalar 4-9 sayısız aracılığıyla diseke edilmiştir. Ayrıca, enfeksiyon için Isd sistemin katkısı art arda 8,10-14 fare modellerinde ortaya konmuştur. Hemoglobin kaynaklı demir edinimi Isd sistemin katkısı kurulması ve büyüme daha zorlu olduğu kanıtlanmıştır. Bir tek demir kaynağı olarak hemoglobin kullanarak Büyüme deneyleri b karmaşıktıry büyüme ortamında serbest demir kirletici ticari olarak temin hemoglobin kararsızlık, ve demir şelatlar ile ilişkili toksisite. İşte biz bu sınırlamalarının üstesinden bir yöntem sunuyoruz. Yüksek kaliteli hemoglobin taze kandan hazırlanmıştır ve sıvı azot içinde saklanır. Arıtılmış hemoglobin içine ilave edilir, orta omurgalı konukçu içerisindeki patojenlerin karşılaştığı demir-fakir ortamda taklit demir tüketmek. S. açlıktan tarafından serbest demir aureus ve biz, hemoglobin bağlamak heme ayıklamak, bakteri hücre zarfı ile heme geçmek ve sitoplazmada heme aşağılamak yeteneğini tamamen bağımlı bir şekilde büyümesine neden hemoglobin minimal manipüle formu ile ilave. Bu tahlil S. hemoglobin-/heme-derived demir iktisap mekanizmaları aydınlatmak isteyen araştırmacılar için yararlı olacaktır aureus ve muhtemelen diğer bakteriyel patojenler.
Demir yaşamın 15 tüm krallıklardan organizmalar tarafından gerekli olan temel bir besindir. Omurgalılar, demir bu öğe tarafından kaynaklanan zehirlenme önlemek için tecrit edilir. Bu haciz de beslenme bağışıklık 16 olarak bilinen bir süreçte mikroplar istila demir gizler. Buna karşılık, patojenler beslenme bağışıklık engelleyecek stratejiler geliştirmişlerdir. Böyle bir mekanizma hemoglobin dayanır, hangi ana 17 içindeki demirin en bol kaynağıdır. Hemogl…
The authors have nothing to disclose.
Bu araştırma, Alerji ve Bulaşıcı Hastalıklar Ulusal Enstitüsü ABD Kamu Sağlığı Servisi hibe AI69233 ve AI073843 tarafından desteklenmiştir. EPS Bulaşıcı Hastalıklar Patogenez bir Burroughs Wellcome Üyesidir. KPH Hücresel ve Moleküler Mikrobiyoloji Eğitimi Hibe Programı 5 T32 A107611-10 tarafından finanse edildi.
Name of Reagent/Material | Company | Catalogue Number | Comments |
HPLC anion exchange column | Varian | PL1551-3802 | |
Drabkin’s reagent | Sigma | D5941-6VL | |
Hemoglobin standard | Pointe Scientific | H7506-STD | |
RPMI | HyClone | SH30011.02 | |
Chelex 100 sodium form | Sigma | C7901 | |
EDDHA | LGC Standards GmbH | ANC 001 | |
Hemoglobin a antibody | Santa Cruz Biotechnology, Inc | SC-21005 | |
Tryptic soy agar | BD | 236920 |