زراعة كبد في الفئران
Summary
نقدم تنقيحا سهلة لوضع هذه التقنية اثنين الكفة الكلاسيكية لزرع الكبد orthotopic في الفئران.
Abstract
وقد تم إحراز تقدم السريرية في مجال زراعة الكبد بتأييد واسع 1،2 النماذج الحيوانية. منذ نشر أول orthotopic فأر زرع الكبد في عام 1979 من قبل Kamada وآخرون. 3، وظل هذا النموذج معيار الذهب على الرغم من مختلف التقنيات البديلة المقترحة 4. ومع ذلك، ويقتصر استخدام أوسع نطاقا من خلال منحنى التعلم حاد 5.
في هذه الورقة الفيديو، وتبين لنا مراجعة بسيطة وسهلة لإنشاء، من تقنية ثنائية الكفة Kamada ل. يتم تنفيذ فوق الكبد الوريد الأجوف مفاغرة يدويا مع الدرز على التوالي، ويتم تنفيذ بورتا الوريد والوريد الأجوف infrahepatic anastomoses الاستفادة من وجود نظام صفعة سريعة رابط 6. تصنيع عدة سريعة رابط ويرد في ورقة منفصلة الفيديو.
Protocol
Discussion
ويمكن للكبد الفئران الحالي نموذج زرع المنشأة بسهولة. في تجربتنا، وهي النقاط الرئيسية القليلة تساعد على الحد من خطر الموت (≤ 20٪). من الوفيات المبكرة، التي تحدث في غضون الساعات الثلاث الأولى من ضخه، هي في معظم الأحيان بسبب وجود احتشاء الأمعاء، نتيجة لمدخل طويل تحامل. ولذلك يوصى للحفاظ على المرحلة anhepatic ضمن الحد المثالي من 15 دقيقة (20 دقيقة مقبول لا يزال). ويمكن تكييف مركزي الانسداد أيضا أن يكون سبب الوفاة المفاجئة وغير إلزامي لطرد جميع الأوردة قبل التفمم.
حالة وفاة تحدث بين يوم واحد وثلاثة بعد العملية الجراحية وغالبا ما تكون بسبب فشل الكبد أو تخثر من الوريد الأجوف. ولذلك ينبغي للمرء تجنب أي الكسب غير المشروع العدواني التنظيف قبل explantation في الجهة المانحة (ونحن مع تدفق أكثر من 20 مل ما يقرب من 60 ثانية) وضمان الحفاظ المناسب الباردة (الغمر الكامل في 0-4 درجة مئوية اكتات المسابقة الحل). من مخاطر الجلطةويمكن انخفضت عن طريق التقليل من التلاعب في البطانية والحفاظ على سلامتها. لا نوصي باستخدام منع تخثر الدم بعد عملية جراحية.
وغالبا ما ترتبط حالة وفاة بين يوم بعد العملية الجراحية أربعة وتسعة إلى الأقنية الصفراوية البكتيرية 7. بناء على خبرتنا، جرعة واحدة من piperacilline / tazobactam (0.03 ز) نظرا قبل البطن ما يكفي للحد من مخاطر عدوى قناة الصفراوية المشتركة.
الموت هو حدث نادر بعد 10 أيام. ولكن نظرا لعدم وجود تدفق شرياني، يمكن ملاحظة بعض المشاكل مع القناة الصفراوية cholastasis 8. قد اعتمادا على احتياجات المحقق أن يعتبر arterialization 9. من الملاحظة، يمكن اعتبار وقت نقص التروية الباردة تصل إلى 24 ساعة إلى 10 مقبول.
وقد صممت في الأصل لنظام سريع رابط لأداء زرع الكبد مع anastomoses الكفة ثلاثة (قصيرة جدا المرحلة anhepatic). ومع ذلك، فإن الشركة المصرية للاتصالات لمدة ثلاثة الكفةchnique يتطلب استخدام الفرجار صغيرة جدا لصفعة الوريد فوق الكبد (SHVC) الأجوف، وأنها لم تحظى بقبول واسع نظرا لخطر التعرض لمشاكل في الكبد تدفق 11-14. نؤيد بالتالي سريعة رابط بمساعدة ثلاثة الكفة تقنية فقط عندما يطلب من الأوقات الإسكيمية دافئ أقصر من عشر دقائق. في معظم الدراسات مع ذلك، مراحل زراعة ما يصل الى 15-18 دقيقة ومقبولة، مما يتيح استخدام تقنية ثنائية الكفة، والصرف الصحي أكثر الفسيولوجية SHVC. كما هو مبين في هذه الورقة الفيديو، ونحن نستخدم بشكل روتيني لنظام سريع رابط في الجزء الثاني من غرس فقط. في حين يلزم بعض الوقت الاضافي جراحية لوضع مقابض سريعة رابط، ويرتبط هذا الجزء من الإجراء مع الحد الأدنى من المخاطر، ويسمح لتقصير من شكر anhepatic المرحلة الحرجة إلى الإدراج أسهل الأصفاد. المزايا الأخرى للنظام سريع رابط أفضل محاذاة سفينة الكسب غير المشروع والجهات المستفيدة، واستخدام الأصفاد على نطاق أوسع مع نتائج أفضل مقارنة مع الدورة الدمويةسبق وصفها تقنيات (بما في ذلك واحد التي وصفها Kamada وآخرون.) 6 (الشكل رقم 7).
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
وأيد CT من قبل مؤسسة العلوم الوطنية السويسرية (التقييم منحة 3232230-126233). الدراسة كانت مدعومة من قبل مؤسسة Artères، ومؤسسة أوروبا Astellas ومؤسسة Boninchi.
Materials
| Tool / Reagent | Company | Catalogue n. | Comment |
| Portal cuff | altecweb.com or smiths-medical.com | Coil 01-96-1729 800/100/420 | Bore : 1.55mm
Wall : 0.30mm Length: 3.5 mm |
| Infrahepatic v. cava cuff | altecweb.com or smiths-medical.com | Coil 01-96-1733 800/100/540 | Bore : 2.40mm
Wall : 0.30mm Length: 3.5 mm |
| Common bile duct stent | common 22G venflon | ||
| 7-0 silk ties | georgetiemann.com | 160-1226-7/0 | |
| 10-0 prolene | ethicon.com | ||
| 9-0 prolene | ethicon.com | ||
| 8-0 prolene | ethicon.com | ||
| Straight micro forceps | s-and-t.net | FRC-15RM-8 | |
| Curved micro forceps | s-and-t.net | FRS-15-RM-8 | |
| Dissection needle-holder | s-and-t.net | B-15-8.2 | |
| Anastomosis needle-holder | rumex.net | 8-021T | |
| Micro clamps | finescience.com | 18055-03 | 6 x 1mm |
| Micro clamps applicator | finescience.com | 18057-14 | |
| Suprahepatic v. cava clamp | pharmap.ch | 13.349.14 | |
| Quick-Linker rings | dltchiropody.co.uk | PAR 10 | modified scalpel blades |
| Quick-Linker approximator | pharmap.ch | UD-04-275 | modified Kocher’s forcep |
References
- Starzl, T. E., Marchioro, T. L., Porter, K. A. Experimental and clinical observation after homotransplantation of the whole liver. Revue internationale d’hepatologie. 15, 1447 (1965).
- Starzl, T. E. Evolution of liver transplantation. Hepatology. 2, 614S-636S (1982).
- Kamada, N., Calne, R. Y. Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage. Transplantation. 28, 47 (1979).
- Kashfi, A. A review of various techniques of orthotopic liver transplantation in the rat. Transplantation proceedings. 37, 185-188 (2005).
- Hori, T. Comprehensive and innovative techniques for liver transplantation in rats: A surgical guide. World Journal of Gastroenterology: WJG. 16, 3120 (2010).
- Oldani, G. A novel technique for rat liver transplantation using Quick Linker system: a preliminary result. Journal of Surgical Research. 149, 303-309 (2008).
- Nosaka, T., Bowers, J. L., Cay, O., Clouse, M. E. Biliary complications after orthotopic liver transplantation in rats. Surg. Today. 29, 963-965 (1999).
- Li, G. L. High incidence of biliary complications in rat liver transplantation: can we avoid it. World J. Gastroenterol. 17, 3140-3144 (2011).
- Peng, Y., Gong, J. P., Yan, L. N., Li, S. B., Li, X. H. Improved two-cuff technique for orthotopic liver transplantation in rat. Hepatobiliary Pancreat. Dis. Int. 3, 33-37 (2004).
- Urata, K. Decreased survival in rat liver transplantation with extended cold preservation: role of portal vein clamping time. Hepatology. 28, 366-373 (1998).
