クロス種の移植による神経堤の移行および分化の解析

鳥類の胚は卵内の胚​​の簡単なアクセスのために多くの脊椎動物の発達過程を研究するためのユニークなプラットフォームを提供します。ウズラのドナー組織が​​OVOでニワトリ胚に移植されたキメラ鳥類の胚は、鳥類の胚によって提示された操作の容易さと細胞集団の消えない遺伝標識のパワーを兼ね備えています。

ウズラ-ニワトリキメラ^1-3渡り鳥神経堤細胞（NCCS）をトレースするための古典的なツールです。 NCCSは、発展途上の神経管⁴の背側領域に由来する胚における細胞の一過性の渡り鳥集団である。彼らは、葉への移行上皮を受け、その後、彼らは軟骨^5-13、メラノサイト^11,14-20、ニューロンとグリア^{21から32まで}を含む様々な種類の細胞に分化する胚の他の地域に移行します。 NCCSは多能性であり、その究極の運命はインフルです。1）彼らは胚^11,33-37、2 rostro -尾軸に沿って発信された神経管の領域）が^{38から44に}移行^するように隣接セルからの信号を、その究極の3）微小で積んだ胚^45,46内の宛先。胚内での最終的な位置と運命に、神経管に由来それらの点から、これらの細胞を追跡し、パターニングおよび器官形成を制御する発達過程に重要な洞察を提供します。

ドナー神経管（グラフトホモトピック）またはドナー神経管（グラフト異所性）の異なる領域の相補的領域の移植はrostro-尾軸に沿って^2,47 NCCSの事前の仕様の違いを明らかにすることができます。この手法は、さらに一側がドナー組織由来されるように、神経管の一方的なコンパートメントを移植するように適応し、反対側の遺跡は、ホスト胚に動じない、yiをすることができます同じサンプル^2,47の内部制御を薪。前方神経管^47を閉じたときにも、HH10した後、後で胚の脳セグメントの移植に適合させることができます。

ここでは、神経管の独立したセグメントから派生した渡り鳥NCCSのトレースを可能にする神経管移植を介して、ウズラ – ニワトリキメラを生成するための手法を報告します。ウズラ固有QCPN抗体を^48から56のドナー由来細胞の種特異的標識は、研究者は実験終了時点で、ドナーと宿主細胞を区別することができます。この手法は、安価で、簡単で、トレース、およびrostro-尾軸^45に沿って事前にパターニングイベントを識別する運命マッピング、細胞系譜を含む多くのアプリケーションを持っています。ので、鳥類の胚へのアクセスのしやすさから、ウズラ-ニワトリ移植技術は、他の操作と組み合わせて含むが、レンズのアブレーション⁴に限定されるものではない0の場合、胚の発達プログラムの摂動にNCCSの特定の渡り鳥ストリームの応答を識別するために、阻害分子^57,58、または^59から61発現プラスミドのエレクトロポレーションを介した遺伝子操作の注入。さらに、この移植技術はまた、鳥類の胚の操作のしやすさとマウス遺伝学の力を組み合わせることがNCCの顔面形態形成への貢献や、マウス、ニワトリキメラを勉強するようなウズラ、アヒルのキメラのような他の種間キメラ胚を生成するために使用することができ⁶²