1. Telemetría Electrocardiograma implantación de dispositivos Una hora antes del comienzo implantación cirugía, administrar carprofeno (4 mg / kg sc) para proporcionar analgesia postoperatoria. Inyectar ketamina / xilazina (Ke: 70 mg / kg, XY: 10 mg / kg, ip) para la anestesia para permitir la preparación inicial de animales incluyendo el afeitado y la inserción de barras de oído antes de cambiar a isoflurano anestesia que es más estable durante la cirugía que permite una mejor regulación de la profundidad y acorta la recuperación post-quirúrgica de la anestesia. Al inicio de la anestesia, aplicar lubricante ocular para los ojos del animal y luego afeitar el tórax, el abdomen y la garganta. Limpie la piel expuesta con lavado quirúrgico, seguido de preparación de la piel alcohólica, seguida de una solución antiséptica. Coloque la jaula de alojamiento en una manta térmica para calentar. Colocar el animal en decúbito supino sobre una placa de homeotermos. Inserte la guata por debajo del cuello para elevar y exponer la garganta. Coloque la nariz co-ne (entrega 1-3% vol / vol isoflurano en oxígeno, 2 L por minuto) sobre la nariz del animal y fijar el cono en su lugar. Fijar las partes delanteras extremidades en una posición semi-extendida para generar tensión de la piel sobre el tórax y la garganta y la nariz para evitar el deslizamiento libre de la ojiva. Insertar la sonda de la manta homeotermos en el recto del animal. Hacer una incisión central en la piel que se extiende desde el proceso xifoides 20 mm caudalmente para exponer la capa muscular. Hacer una incisión a lo largo del juego línea alba, a continuación, la cavidad peritoneal. Insertar el dispositivo de telemetría de ECG en la cavidad peritoneal con cables que se extienden desde el extremo rostral de la abertura, y suturar el caudal de 15 mm de la abertura en el peritoneo. Hacer una incisión en la garganta que cubre la tráquea, dejando al descubierto el músculo esternohioideo. Inserte unas pinzas de cocodrilo del oído en el espacio subcutáneo de la incisión hacia rostral caudal, y utilizar estos para formar una subcutaneous túnel de la rostral a la incisión caudal. Sujete el cable positivo (rojo) de plomo en las pinzas y retirar el plomo a través del túnel. Levante el músculo esternohioideo el uso de fórceps e inserte la punta del cable positivo dorsalmente hacia el mediastino anterior derecha, dejando aproximadamente un bucle de 1 mm de cable de rostral a la inserción. Suture el plomo en el que se extiende desde la cavidad torácica y en la parte superior del bucle al músculo subyacente. Exponer la pared dorsal de la xifoides, y suturar la punta del cable negativo de la superficie expuesta. Ver la señal del dispositivo implantado para asegurar una adecuada ECG puede ser obtenido. Pase el cable sobrante dentro de la cavidad peritoneal. Sutura cerró la pared peritoneal, la línea alba, y la piel abdominal. Sutura cerró la piel de la garganta. Dejar de entrega de isoflurano, y continuar ofreciendo el oxígeno hasta que el movimiento espontáneo que se observa. Cuando se observa el movimiento, suelte la extremidades anteriores unad devolver el animal a su jaula. Mover la jaula de alojamiento de modo que aproximadamente la mitad de la jaula está en la almohadilla de calor. Esto permitirá que el animal, cuando móvil, para moverse entre las zonas más calientes y más frías de la jaula. Supervisar el animal hasta ambulatoria, y salir de la jaula en la manta térmica durante 24 horas. Administrar carprofeno (4 mg / kg sc) cada 24 horas durante 3-5 días. 2. Cerebro implante de electrodos Una hora antes del comienzo del implante, administrar carprofeno (4 mg / sc kg) para analgesia postoperatoria. Inyectar ketamina / xilazina (Ke: 70 mg / kg, XY: 10 mg / kg, ip) para la anestesia. Al inicio de la anestesia, aplique ungüento oftálmico para proteger los ojos, luego afeitarse la cabeza del animal. Limpie la piel expuesta con betadine matorrales, seguido por el alcohol, seguido de betadine. Colocar el animal en decúbito prono sobre una placa de homeotermos. Posición una barra hueca oído aproximadamente en la posición final esperado,y levantar y posicionar el animal para que la barra oído está situado en el meato acústico externo. Deslice la segunda barra hueca en la oreja del conducto auditivo externo contralateral. Con unas pinzas de dientes de rata, abrir la mandíbula del animal y conectar los incisivos superiores sobre el soporte del diente. Deslice la ojiva sobre la nariz, y comenzará la entrega de isoflurano (1-3% v / v de oxígeno). Los animales se mantienen ahora en toda la cirugía con este anestésico. Hacer una incisión en la piel de la cabeza, de aproximadamente 1 mm a la izquierda de la línea media y se extiende desde 3-4 mm rostral a 2-3 mm caudal de lambda. Retirar la piel y el músculo lateral de la incisión, dejando al descubierto el hueso parietal y hueso interparietal. Frote la superficie del hueso expuesto usando 20% de solución de peróxido de hidrógeno y una gasa. Perforar un pequeño agujero en los huesos parietales izquierdo y derecho, y atornillar un tornillo de acero quirúrgico en cada agujero dejando un pequeño (0,5 mm) de espacio entre la HEAd de cada tornillo y la habilidad. Conectar estos tornillos al suelo y puntos de referencia de los electrodos del cabezal de la platina de alta impedancia. Haga un agujero de aproximadamente 2 mm de lado en la extensión lateral-la mayoría de los huesos interpariental. Limpie el orificio con solución salina estéril para eliminar el polvo de hueso o fragmentos de hueso que pueden dañar el electrodo. Coloque el altavoz de acoplamiento a la barra hueca oído izquierdo. Con la punta de una aguja, hacer una incisión en la duramadre en el plano sagital. Llevar el manipulador electrodo en su sitio encima de la abertura, con un ángulo de 10 ° caudorostral. Insertar el electrodo manualmente aproximadamente 2 mm en la superficie del cerebro. Asegúrese de que el amplificador está encendido, y luego sellar la cámara de grabación. Comenzar la entrega cíclica de la baja (2-8 kHz), de rango medio (16-24 kHz) y alta (32 kHz-44kHz) la frecuencia de paso de banda de ruido filtrado. La tasa máxima a la que estalla deben ser entregados es una explosión cada 200 ms. Supervisar la actividad neuronal unt cada canal para detectar las respuestas a la presentación de ruido. Continuar la inserción del electrodo hasta que la distancia total insertado se está acercando a 8 mm. Si el límite de 8 mm se alcanza sin respuestas neuronales que se detectan, retirar y volver a colocar el electrodo a otro de inserción. Si el núcleo coclear (NC) se ha alcanzado, los sitios en la punta del electrodo se debe principalmente a que muestra las respuestas de alta frecuencia estímulos. Si los electrodos están situados en el núcleo ventral coclear (VCN), las respuestas a estímulo acústico debe tener un componente comienzo fuerte (1-5 ms), seguido por una rápida disminución de la actividad. Continuar para insertar el electrodo hasta que las puntas de los electrodos detectar las respuestas a los estímulos de baja frecuencia, o auditivo impulsada por la actividad deja de producirse (en cuyo caso, el electrodo puede haber pasado completamente a través de la NC y puede ser necesario revisar el electrodo colocación). Construir un mapa de la respuesta en frecuencia de amplitud de las neuronas en el electrodo sitas. Esto se consigue por el sonido presentado en toda la gama de frecuencia deseada (normalmente 1-44 kHz o 1-80) a amplitudes 1-70 dB, con 10 repeticiones de cada estímulo. Un estímulo puede ser entregado cada 300 ms hacer el mapa de la NC. Si el mapa es inadecuada, considerar la revisión de la colocación del electrodo. Aplicar una fina capa de elastómero de silicona ligeramente por encima de los vástagos de los electrodos expuestos, de tal manera que el elastómero fluirá hacia abajo los vástagos y capa de ambos vástagos y la superficie expuesta del cerebro. Aplicar una primera capa de cemento de polímero prótesis alrededor del electrodo. El cemento debe ser mínimamente viscoso, para reducir el riesgo de que el electrodo se mueve en el proceso de aplicación. Asegúrese de que el polímero no cubre los tornillos en los huesos parietales o los cables conectados. Espere a que el acrílico se endurezca, lo que suele tardar unos 5-10 minutos. Separar la tierra y los cables de referencia del cabezal de la platina de los tornillos en los huesos parietales. Con unas pinzas, gently enrollar el cable de tierra del electrodo alrededor del tornillo en el hueso parietal izquierdo. Aplicar una segunda capa de cemento de polímero prótesis. Esta segunda capa debe encapsular los dos tornillos, y el flujo en el espacio entre la cabeza del tornillo y el cráneo. De este modo, los tornillos se mantenga el acrílico y el electrodo en el cráneo. Espere a que el acrílico se endurezca. Quitar el cabezal de la platina del conector del electrodo. El uso de pinzas de dientes de rata, levantar la piel lateral al polímero sobre el polímero, y utilizar una sutura en bolsa de tabaco para cerrar la piel alrededor del conector del electrodo expuesto. Eliminar las barras de los oídos, la liberación de la cabeza. Fin de la entrega de isoflurano, y continuar proporcionando oxígeno a través del cono de la nariz hasta que el movimiento espontáneo que se observa. Volver al animal a la jaula de alojamiento. Mover la jaula de alojamiento de modo que aproximadamente la mitad de la jaula está en la almohadilla de calor. Esto permitirá que el animal, cuando móvil, para moverse entre las zonas más calientes y más frías de lajaula. Supervisar el animal hasta ambulatoria. Deja la jaula de alojamiento en la almohadilla de calor durante 24 horas. Administrar carprofeno (4 mg / kg sc) cada 24 horas durante 3-5 días. 3. Acondicionamiento Colocar el animal en la cámara de prueba. Active el dispositivo de telemetría ECG. Deje que el animal para aclimatarse a la cámara de prueba durante cinco minutos antes de comenzar el acondicionamiento. Esto permitirá que el ritmo cardíaco para volver a una línea de base, como la manipulación conduce a la elevación del ritmo cardíaco. Realice el procedimiento de acondicionamiento: Entregar un miembro seleccionado al azar de la pareja de estímulo acústico en varias ocasiones en ráfagas de 250 ms, separados por 250 ms de silencio por 80-170 s. Cada presentación del estímulo debe tener un tiempo de subida y caída de 10 ms para evitar un "clic" que se percibe, que la percepción cubre una gama de frecuencias de sonido. Comenzar alternando el segundo miembro del par de estímulo acústico con la primera, presentando each para el tono de 250 ms seguido por una ms 250 de silencio. Después de 9,5 s de la s 10 periodo de la alternancia de presentación de tonos, administrar un ms 0,5 pies de choque (0,7 mA). Dejar de presentaciones de tono durante 30 s para permitir que el ritmo cardíaco se estabilice. Reanudar la entrega tono de par (de 3.4.1). Pares de tonos de manera óptima debe ser presentado en una secuencia aleatoria, y al menos 12 pares de tono se debe utilizar para asegurar que el condicionamiento generaliza a todos los pares de frecuencia y no es específico para las frecuencias de tono utilizados. Continúe este proceso hasta 48 ciclos del procedimiento (ensayos) se han completado. Desactive el dispositivo de ECG, y devolver el animal a la jaula. 4. Pruebas Anestesiar al animal utilizando isoflurano (1-3% vol / vol en oxígeno). Conecte el cable de estimulación neuronal para el conector del electrodo expuesta. Colocar el animal en la cámara de prueba. Active el dispositivo de telemetría ECG. </ Li> Deje que el animal pueda recuperarse de la anestesia isoflurano y aclimatarse a la cámara de prueba durante diez minutos antes de comenzar la prueba. Esto permitirá que el ritmo cardíaco para volver a una línea de base y la recuperación de la breve efecto anestésico. Realice el procedimiento de prueba. Entregar un miembro seleccionado al azar de un par de estímulo acústico en varias ocasiones en ráfagas de 250 ms, separados por 250 ms de silencio por 80-170. Cada presentación del estímulo debe tener un tiempo de subida y caída de 10 ms para evitar un "clic" que se percibe, que la percepción cubre una gama de frecuencias de sonido. Comenzar alternando el segundo miembro de la pareja estímulo acústico con la primera, la presentación de cada tono de 250 ms, seguido de 250 ms de silencio. Después de 9,5 s de la s 10 periodo de la alternancia de presentación de tonos, administrar un 0,5 ms pies choque. Dejar de presentaciones de tono durante 30 s para permitir que el ritmo cardíaco se estabilice. Comenzar la entrega de un azar selemiembro de la Dirección Ejecutiva de un par de estimulación cerebral eléctrica en varias ocasiones, con períodos de 250 ms de estimulación, separados por 250 m de la no estimulación de 80 a 170 s. Comenzar alternando el segundo miembro del par de estímulo con la primera, presentando cada estímulo para 250 ms seguido por un 250 ms no estimulación período. Continúe alternando la estimulación durante 10 s. Dejar de presentaciones de los estímulos durante 30 s para permitir que el ritmo cardíaco se estabilice. Reanudará la entrega de estímulo par (de 4.6.5 o 4.6.1). Pares de estímulo deben ser presentados en una secuencia aleatoria, y por lo menos 20 ensayos de cada par de estímulo deben ser entregados para garantizar la suficiente frecuencia cardíaca se recopilan los datos para proporcionar un resultado medio claro y minimizar la variabilidad. Distribución de los ensayos con los estímulos acústicos a lo largo de la sesión de pruebas reduce la probabilidad de que la extinción se producirá durante el procedimiento. Desconecte el cable de la estimulación del animal. Desactive la devi ECGce. Volver al animal a la jaula de alojamiento. 5. Los resultados representativos Una muestra de grabación ECG tomada usando el dispositivo de telemetría implantado una semana después de la implantación se muestra en la Figura 1. Tal grabación típicamente se puede obtener de los dispositivos implantados, y los dispositivos de seguir funcionando adecuadamente para grabar en exceso de seis meses, incluso si sutura soluble se utiliza para adherir a los cables de los músculos. El registro del ECG se muestra en la Figura 2 se obtuvo de un animal durante ocho meses después de la implantación. Las figuras 3 muestra la ubicación de un éxito de la implantación. La colocación de los electrodos tiene muchos sitios de los electrodos en el núcleo coclear posteroventral (PVCN), que proporciona la estimulación y el acceso a la grabación de muchos de los aspectos dorsoventral. Las frecuencias de las respuestas de cada zona de los electrodos para este implante se presentan en la Figura 4. El área largo de la PVCN en la cual los electrodos se distribuyen conduce a poblaciones de células accesibles para la grabación y la estimulación 'sintonizado' para una amplia gama de frecuencias. Por otra parte, las propias poblaciones se captan con precisión – que sólo responden a una estrecha banda de frecuencias de sonido (véase Figura 5). En contraste, una mala colocación se muestra en la Figura 6. En este caso, el electrodo se coloca demasiado medialmente, y no se ha insertado suficientemente profunda para penetrar en el PVCN. Como consecuencia, sólo los sitios de electrodos cerca de las respuestas de punta muestran a sonar como se muestra en la Figura 7. Además, la gama de frecuencias a las que las poblaciones de células accesibles están sintonizados está muy limitada. La afinación de las poblaciones de sí mismos es estrecha (ver Figura 8), pero la distribución agrupada de las frecuencias centrales de las poblaciones de células hace que estimular las distintas regiones de frecuencia imposible. _content "> Base de datos de frecuencia cardiaca osciló entre acondicionado presentaciones de los estímulos acústicos. para dar cuenta de esta variabilidad, frecuencia cardíaca cruda (FC) los datos se normalizó como una proporción de recursos humanos observa cuando la alternancia de estímulo inició (tiempo 0). La Figura 9 muestra los datos en varios formas recogidas durante la sesión de condicionamiento en primer lugar. Un ejemplo de los resultados obtenidos de recursos humanos en otro animal durante la última parte de las sesiones de condicionamiento inicial se presenta en la Figura 10. El proceso de acondicionamiento a los estímulos acústicos es rápida, y fuertes cambios en la FC se puede observar con pocos ensayos; 7. en el caso de las figuras 9 y 10 El cambio en la FC observada inmediatamente después del inicio de la alternancia de estímulo (ver 3.4.1 y 3.4.2) proporciona evidencia de que el animal es capaz de discriminar entre la inicial repetida estímulo y el segundo estímulo añadido posteriormente. Después de que comiencen las sesiones de prueba, en la que eléctrcos estímulos nerviosos en lugar de los estímulos acústicos suelen ser entregado, la inclusión de presentaciones de los estímulos acústicos permite la confirmación de que los efectos de acondicionamiento todavía están presentes. Un cambio general de la FC en respuesta al inicio de la presentación del estímulo acústico confirma que un efecto condicionado a estímulos acústicos permanece presente, como se muestra en la Figura 11. Del mismo modo, la Figura 12 se presenta la media de cambio de recursos humanos proporcionales en todo el inicio de la alternancia en el tono acústico primera sesión de pruebas. Al igual que con la Figura 9 y 10, el HR relativamente estable antes de la introducción del segundo estímulo en contraste con el rápido cambio de la FC después de la introducción del segundo estímulo proporciona evidencia de que la discriminación entre los dos tonos se ha producido. En contraste, la ausencia de detección puede verse en la Figura 13 en la que la estimulación eléctrica está comenzando. La media proporcional de recursos humanos chan GE a través de 10 ensayos muestra ninguna indicación de la rápida caída consistente observada cuando se produce la detección, como en la Figura 11. De manera similar, la ausencia de un cambio rápido y consistente en el ritmo cardíaco en la Figura 14 indica que los dos estímulos eléctricos que esté entregados no son lo suficientemente diferentes para la discriminación que se produzca. Tanto antes del comienzo del período de alterna (antes de la hora 0) y después comienza alternancia, el cambio medio proporcional de la FC permanece cerca de la línea de ningún cambio. Un patrón más característico de la discriminación entre los dos miembros de un par de estímulo neural se muestra en la Figura 15. Una disminución en el ritmo cardíaco se produce rápidamente después del comienzo de la alternancia estímulo, seguido por un aumento sustancial en el ritmo cardíaco. La estrategia de estimulación particular utilizado en este caso fue un éxito en producir una respuesta conductualmente relevante. "Src =" / files/ftp_upload/3598/3598fig1.jpg "/> Figura 1. Un registro de ECG obtiene utilizando el dispositivo de telemetría implantado una semana después de la implantación. La señal se ve en esta grabación es en gran medida típica de los registros obtenidos utilizando estos dispositivos. Figura 2. Un registro del ECG obtenido utilizando el dispositivo de telemetría implantado seis meses después de la implantación. No es la degradación insignificante de la señal a grabar en ese período de tiempo, y esta señal es sin duda adecuado para el cálculo del ritmo cardíaco de los animales. Figura 3. Una reconstrucción en 3D de una exitosa colocación de los electrodos, el uso combinado de rayos X de tomografía computarizada y cortes histológicos. Los dos vástagos de electrodos penetrado en el núcleo coclear posteroventral con electrodos de orientaciónTed para hacer frente a la estructura. Figura 4. El mapa de las respuestas electrofisiológicas grabados con la colocación de los electrodos de la Figura 3. Cada histograma muestra los datos de actividad en el sitio de electrodo en respuesta a una presentación de una frecuencia acústica; cada columna representa un período de 25 ms de tiempo. En ambos vástagos de la matriz de electrodos, las respuestas se detectan en cada sitio de electrodo individual sólo en respuesta a una banda muy estrecha de frecuencias, pero estas bandas estrechas están distribuidos en una amplia gama de frecuencias. Esta distribución es ideal, ya que muchos distintos asociados frecuencia de las regiones del cerebro puede ser estimulado de forma independiente. Figura 5. La respuesta electrofisiológica en el canal 10 del implante presentan en las Figuras 3 & amp; 4. Idealmente, la colocación de electrodos debe dar lugar a respuestas neuronales a estímulos acústicos ser detectado en varios canales con una amplitud de sonido tan bajos como 10 dB, según se desprende de este ejemplo. Figura 6. Una reconstrucción en 3D de una mala colocación de los electrodos. Mientras que el ángulo caudorostral del electrodo estaba en lo cierto, ya era demasiado medial. Además, el electrodo no se insertó suficientemente profunda, lo que resulta en el sitios más cercanos a la punta del electrodo se encuentra dentro del núcleo coclear dorsal. Figura 7. El mapa de las respuestas electrofisiológicas grabados con la colocación de los electrodos como se muestra en la Figura 6. Actividad que está ocurriendo en la punta de cada vástago de la matriz de electrodos, pero hay poca variación en el estímulo acústico frecuenciafrecuencia que provoca la actividad en cada zona de los electrodos. Tal implantación no permite la estimulación de la capa de frecuencia distinta para las pruebas de discriminación. Figura 8. La respuesta electrofisiológica en el canal 28 en la colocación de los electrodos se muestra en las figuras 6 y 7. Estímulo acústico producir ráfagas fuertes de actividad, similares en frecuencia espiga a la observada en la implantación exitosa (Figura 3). Umbral es también muy bajo, con las respuestas que se detectaron en respuesta a los tonos a 20 dB. Si hubo una mayor variación en las frecuencias a las cuales las más fuertes se produjeron a través de las respuestas de otros canales de la matriz de este canal sin duda sería adecuada para la estimulación. Figura 9. Comparación de la frecuencia cardiaca en bruto (A) verses media proporcional (B) los datos recogidos durante la sesión de condicionamiento por primera vez en un animal. Las respuestas de 7 presentaciones se muestran. Debido a la variación en la frecuencia cardiaca de partida antes del comienzo de la alteración de tono, la frecuencia cardíaca media en bruto (± 95% intervalos de confianza) no muestran adecuadamente el grado de cambio de una caída inicial de la frecuencia cardíaca seguido por la subida como se indica en particular en bruto Un rastro (abajo). La media de cambio proporcional en los datos de frecuencia cardiaca en que se divide la frecuencia cardíaca por la frecuencia cardíaca en el momento de la presentación condicionada estímulo acústico para cada traza se presenta en (B). Esto muestra una disminución estadísticamente significativa después de la presentación del estímulo condicionado con un aumento significativo a finales reflejado con el 95% intervalos de confianza. Huellas individuales proporcionales de frecuencia cardíaca se muestra (B, abajo). Figura 10. Media proporcional del corazón r se comió el cambio de 8 s antes del 8 de s después del inicio de la alternancia de la presentación del estímulo acústico, la combinación de datos de las sesiones de acondicionamiento de la segunda y tercera. Los datos presentados incluyen siete ensayos presentados en las dos sesiones de condicionamiento, cuatro en la sesión de acondicionamiento de primero y tres en el segundo. En respuesta a la presentación del estímulo alterna, una gran caída inicial de la frecuencia cardíaca produjo seguido por un aumento en la frecuencia cardíaca tarde. Figura 11. El cambio promedio proporcional de la frecuencia cardíaca de 10 s antes de la 10 s después del comienzo de la presentación del estímulo acústico después de un período de silencio de 30 s. Los datos del ensayo fue tomado de la primera sesión de pruebas e incluye seis presentaciones de los estímulos acústicos. Un claro descenso a principios de la frecuencia cardíaca proporciona evidencia de la discriminación entre los estímulos acústicos presentados. es/ftp_upload/3598/3598fig12.jpg "/> Figura 12. El cambio promedio proporcional de la frecuencia cardiaca a partir de 8 s antes del 8 de s después del inicio de la alternancia de la presentación del estímulo acústico, tomado de la primera sesión de pruebas y que incluye cinco presentaciones de los estímulos acústicos. Un claro descenso a principios de la frecuencia cardíaca proporciona evidencia de la discriminación entre los estímulos acústicos presentados. Figura 13. El cambio promedio proporcional de la frecuencia cardíaca de 10 s antes del 10 de s después del comienzo de la estimulación eléctrica del cerebro después de un período de silencio de 30 s. Los datos del ensayo fue tomado de las sesiones de pruebas de la primera y segunda, e incluye 18 presentaciones de estimulación eléctrica, todos con los mismos ajustes de estimulación. La ausencia de una caída en particular en la frecuencia cardíaca, especialmente próximo a 0 momento en que comienza la estimulación, sugiere que el animal es incapaz de detectar el Stimulnosotros. Figura 14. El cambio promedio proporcional de la frecuencia cardiaca a partir de 8 s antes del 8 de s después del inicio de la alternancia de la presentación del estímulo eléctrico (ver 4.6.5 y 4.6.6), tomado de la primera sesión de pruebas y que incluye 33 presentaciones de los estímulos eléctricos. No hay un patrón consistente de cambio en el ritmo cardíaco se produce el tiempo cerca de 0, lo que sugiere que los estímulos alternos no son lo suficientemente diferentes para que se produzca la discriminación. Figura 15. Ejemplos representativos de las huellas individuales (A) y la media proporcional de los datos de ritmo cardíaco (B, C) de 8 s antes de la 8 s después del comienzo de la presentación alterna estímulo eléctrico, tomada de la séptima sesión de pruebas de un segundo animal, y que incluye 12 presentaciones de los estímulos eléctricos. Una disminución significativa en HR se produce rápidamente después de la introducción del segundo estímulo neural seguido por un aumento significativo en la frecuencia cardíaca refleja lo que sugiere la diferencia entre el estímulo primero y segundo se ha detectado por el animal. El grado de error y la varianza de la respuesta se puede ver en la proporcional media ± error estándar (SE) trama se muestra en (B). La importancia de la caída y la subida después de la presentación del estímulo segundos se puede verificar usando el 95% intervalos de confianza aplicados a los datos mostrados en la (C). La respuesta se ve en (C) es similar a la respuesta ver en la Figura 9 B.