Acque poco profonde (Paddling) Varianti di test labirinto d'acqua nei topi

1. Le piscine per bambini a Oxford La piscina per bambini è stata fatta in base a tre disegni successivi, Mc 1-3. Tutti impiegare (2 cm) di acqua poco profonda contenuta in una (per migliorare la sua avversione) base bianca, che è circondata da pareti trasparenti in perspex o plastica acrilica trasparente. Questi hanno true / false uscite previste in loro. Le false uscite sono occluse da nere spine di legno verniciato, mentre la vera uscita è aperta e si è unito ad un tubo di plastica nero, che può essere rimosso con il mouse all'interno. Il mouse è poi rapidamente e atraumatico tornò alla sua gabbia casa mentre all'interno del tubo. Dopo la prima pubblicazione della piscina per bambini, è stato segnalato che il ritorno alla gabbia a casa è stato anche un motivatore efficace per l'apprendimento del labirinto Lashley III 2. Una temperatura dell'acqua di 20-25 ° C è utilizzato. 20-21 ° C è ideale, si è notato che alcuni topi sembrano meno motivati ​​a temperature più elevate. contenuto "> Il primo labirinto 5 era circolare. Tuttavia, a volte i topi (in particolare quelli con lesioni all'ippocampo) sembrerebbero non notare il tubo di uscita aperta. Un design ottagonale, con i tubi di uscita poste negli angoli in modo da attirare l' attenzione dei topi, notevolmente migliorato questo problema. Tuttavia, il tasso di errore al prestazioni possibilità sarebbe 4/trial, al contrario di 6/trial con il disegno circolare 12-tubo. Quindi una piscina dodecagonale viene ora utilizzato con 11 falso e 1 vera uscita impostato negli angoli fatte dalle giunzioni delle pareti. 1.1. Evoluzione e caratteristiche delle vasche per bambini Mc 1, una piscina circolare 85 centimetri di diametro con 12 vero / falso uscite (Figura 1). Mk 2: una vasca ottagonale 86 centimetri di diametro con 8 true / false uscite previste negli angoli. Mc 3, una (12 lati) piscina dodecagonale 120 centimetri di diametro con 12 vero / falso uscita impostate nel granoERS (Figura 4). In tutto quanto sopra (e la Y-labirinto per bambini, vedi sotto) i tubi di uscita sono stati il ​​40 mm di diametro. Tuttavia, è stato occasionalmente intuì che i topi erano riluttanti a entrare in questi, e prestazioni di controllo in Y-labirinto a volte tuffo dopo che erano state rispondendo bene. Pertanto, e considerando come prontamente entrarono dell'apparato scavando (vedi pubblicazione Giove "Valutare scavatori, la costruzione del nido e di accaparramento nei topi"), inoltre, che i fori di uscita del labirinto Barnes sono da 50 mm di diametro, si è ritenuto se 40 millimetri era troppo piccola. Un test è stato effettuato in casa gabbia di sei topi C57BL / 6. (Sembrano più pronti ad entrare tubi 40 millimetri nella gabbia casa come presumibilmente lo stress è più basso qui che in un pezzo di apparato, così facendo il test nella gabbia casa ridurrebbe al minimo le differenze di ingresso se i tubi più piccoli erano leggermente avversione, rendendo il testare più conservatore). Due millimetri tubi e tubi due 50 millimetri 40 sono stati collocati sul pavimento in unalternato. Come previsto, ci sono stati più voci in tubi di 50 mm (28 voci) a 40 mm (9 voci). Pertanto i test pilota sono previsti su una Y-labirinto nuovo provette da 50 mm di uscita, se invece è successo ai vecchi tubi di 40 mm sulla piscina e vasca dodecagonale Y-labirinto saranno sostituiti con nuovi quelli mm 50. Come la piscina per bambini, vasca per Y-labirinto e spaziale novità Y-labirinto sono tutti i test spaziali, basandosi sui riferimenti stanza che il topo vede attraverso le pareti trasparenti del dispositivo, la stanza deve essere ben arredate con elementi distintivi (ad esempio scaffali, armadi, forme plastiche nere sulle pareti). 2. Esecuzione della Piscina per bambini Posizionare il mouse al centro della piscina affaccia su una delle quattro posizioni sul perimetro (9, 12 o 03:00 se il tubo di fuga è a ore 6). Posizionamento è semi-casuale, un massimo di tre prove consecutive può essere nella stessa direzione. Questo può essere difficile da realizzare nella pratica, perché comeapprendimento procede i topi tendono a orientarsi verso l'uscita corretta in quanto sono abbassati in piscina per la coda. Se fanno questo fortemente nessun tentativo dovrebbe essere fatto per costringerli nella posizione prevista, poiché sono semplicemente dimostrando apprendimento. Rilasciare quando sono appena sopra l'acqua, come allora cadono dentro e immediatamente sapere che non sono più detenuti. Lentamente rilasciando loro risultati in loro che lottano per liberarsi e questo può compromettere l'orientamento iniziale. Ciò vale anche per l'Y-maze bambini. Lunghezza di prova massima è di 60 sec. Se il mouse non riesce a scappare da allora, guidare manualmente verso l'uscita utilizzando un paio di chiare pale perspex, ciascuno dei quali misura circa 30 x 20 cm. Le misure adottate sono il tempo di trovare l'uscita (definizione: tutti di testa all'interno del tubo) e gli errori. Gli errori sono stati definiti come venire entro la lunghezza di una testa da un tubo (tra cui la vera uscita). Passando vicino al reale uscita, senza voce, si verifica generalmente infrequently dopo le prime prove. Anche se un caso può essere fatto che questo è un problema, una visione alternativa è che i topi con problemi di cognizione spaziale fanno perché non sanno c'è un uscita lì intorno. I controlli non sanno, e quindi indagare più a fondo. Un soffitto di errore 11 / trial è imposto sul numero di errori nell'analisi, a prevenire fenomeni di disallineamento dei dati. Questo sarebbe mitigare contro un disavanzo di essere trovati nei topi spazialmente compromessa, cioè è una misura conservativa. I topi che non riescono a raggiungere l'uscita entro 60 secondi viene assegnato un punteggio di 11 errori per quel processo. Quindi 60 sec volte hanno sempre 11 errori. 3. Il Paddling Y-labirinto Per semplificare la procedura di piscina per bambini e l'apparato si è deciso di sperimentare un Y-labirinto, operato secondo gli stessi principi come le piscine per bambini. L'apparecchiatura consiste di tre bracci di polistirolo trasparente o Perspex, ogni 30x 8 x 20 cm. Questo è montato su una base bianca (Figura 7). Bianco è stato scelto per massimizzare l'avversione del colore del pavimento e così incoraggiare fuga dal poco profondo (2 centimetri di profondità). Come nel labirinto acqua, c'è solo un vero uscita, con gli altri due bracci terminante falsi uscite che sembrano la stessa dall'interno del labirinto (figura 8). Esecuzione del paddling Y-labirinto Posizionare il mouse al termine di uno dei bracci chiusi, rivolto verso il centro. La sequenza dei bracci scelti come posizione iniziale è definita da una sequenza semi-casuale; non più di tre prove consecutive con la stessa posizione, e numeri uguali dei bracci sinistro o destro. Ogni prova dura 60 sec. Se il mouse non riesce ad uscire (testa intera in tubo di partenza) entro questo tempo, incoraggiare il passaggio al braccio con l'aiuto di un pezzo di perspex trasparente. La base del braccio di uscita è bloccata dal perspex e il mouse permesso di trova l'uscita da sé, questodovrebbe favorire un migliore apprendimento di spingerlo a destra nel tubo. Ma questo può essere necessario ricorso a se il mouse è riluttante ad entrare nel tubo dopo 15 sec. Prendere le misure del tempo totale per uscire e il numero di errori (intero coda esclusi corpo entra in un braccio cieco). Segnando il paddling Y-labirinto Ci sono due definizioni di un prova corretta: innanzitutto uno in cui il mouse trova l'uscita in <60 sec e non fa delle entrate nelle braccia cieche, con errori essendo realizzato SE bracci ciechi sono inseriti e / o se l'uscita non viene trovato entro 60 sec. Questa analisi confonde fallimenti per iniziare a muoversi con errori nelle voci del braccio. In secondo luogo, l'analisi di prova che enfatizza la capacità cognitiva può essere effettuata escludendo, per ogni mouse, tutti i processi in cui il mouse non ha lasciato il braccio di partenza entro 60 sec, (vale a dire eliminare tutti i 0 +60 punteggi) poi calcolare la% corretta del rimanenti prove. 4. Due tipi di Y-mazeCombinato 1. Apparato Quando si costruisce una vasca Y-labirinto, è utile incorporare due porte per permetterle di essere eseguito come (secco) esperimento novità memoria spaziale 6 (Figura 13). Una porta a ghigliottina trasparente copre il foro di uscita nella parete di fondo del braccio di uscita, mentre una porta a ghigliottina opaca può essere inserita per sigillare di un braccio dagli altri due durante la fase di campionamento della prova. E 'importante che i corridori di queste porte non sono alla portata dei topi, in quanto altrimenti possono distogliere la loro attenzione perché appaiono potenziali vie di fuga. Idealmente essi dovrebbero estendersi sette centimetri verso il basso dalla parte superiore del muro labirinto. 2. Set-up Posizionare un sottile (0,5 cm) strato di legno trucioli lettiera sul pavimento della Y-labirinto. Questo è ridistribuito tra le due fasi di test per singoli topi, e tra i topi. Per le migliori pratiche, per rendere l'ambiente olfattivo more simile per i primi contro la successiva topi, posizionare una o due topi non-sperimentali nel labirinto per pochi minuti prima l'esperimento ha inizio. 3. Procedura Con il braccio di uscita bloccata dalla porta opaca e il suo foro di uscita bloccata dalla porta trasparente, posizionare il mouse nel braccio di partenza (una delle due non-uscita bracci del labirinto) e permettono di esplorare per 5 min. Poi rimuoverlo, sollevare la porta opaca per consentire l'accesso a tutti e tre i bracci, sostituirlo nel braccio di inizio e di osservarlo per 2 min. Annotare il numero di voci e il tempo trascorso in ogni braccio. Topi di controllo dovrebbero ricordare che i primi due braccia, e passare più tempo nel braccio precedentemente inaccessibili.