عالية الكثافة تسجيلات EEG من الفئران تتحرك بحرية باستخدام بوليميد المستندة Microelectrode
Summary
في هذه المقالة ، وصفنا إجراء الجراحة ونصائح للتعامل مع زرع رقيقة جدا مجموعة microelectrode بوليميد على أساس (PBM – الصفيف) على الجمجمة الماوس لاقتناء عالية الكثافة تصوير الدماغ (EEG) في نموذج الفأر.
Abstract
الكهربائي (EEG) يدل على النشاط الكهربائي في المتوسط من سكان العصبية على مستوى واسع النطاق. ويستخدم على نطاق واسع كأداة رصد الدماغ موسع في علم الأعصاب الإدراكي ، وكذلك أداة لتشخيص الاضطرابات الصرع والنوم في الأعصاب. ومع ذلك ، فإن الآلية الكامنة وراء جيل إيقاع EEG لا تزال تحت الحجاب. أدخلت مؤخرا بوليميد المستندة microelectrode (PBM – الصفيف) للماوس عالية الدقة EEG 1 هي واحدة من المحاكمات للإجابة على الأسئلة على الاشارات العصبية الدماغي على أساس مورد الوراثية الغنية التي تحتوي على نموذج الفأر لتحليل عملية معقدة الجيل EEG. هذا التطبيق من nanofabricated الصفيف PBM لجمجمة الفأر هو أداة فعالة لجمع واسع النطاق نشاط المخ لدى الفئران المعدلة وراثيا ، وتتسع لتحديد يرتبط العصبية على إيقاعات EEG معينة بالتعاون مع السلوك. لكن في سماكة رقيقة جدا وبنية متشعبة يسبب متاعب في التعامل مع وغرس الصفيف PBM. عرضت في شريط الفيديو ، ووصف خطوات إعداد وجراحة لزرع الصفيف PBM على جمجمة فأر خطوة بخطوة. كما يتم توفير معالجة وجراحة نصائح لمساعدة الباحثين ينجح في زرع.
Protocol
Discussion
نحن هنا التقرير العمليات الجراحية وتسجيل للحصول على كثافة عالية في التحرك بحرية EEG الفئران. هذه الطريقة تمكننا من الحصول على خرائط المخ وظيفية من الفأر نموذج لدراسة الآليات الجزيئية من 1،2 إيقاعية عفوية أو أنشطة الحدث الدماغ ذات الصلة.
الاستحواذ على كل القنوات في الصفيف ، PBM هو شرط ضروري للحصول على كامل خرائط الدماغ ، مما يجعل غير آمن للاتصال في كل قناة وصعبة للغاية. للحفاظ على الاتصال المستمر للقناة في الجمجمة ، تم العثور على الإجراءات التالية لتكون هامة. بادئ ذي بدء ، قد أي حطام الأنسجة على الجمجمة الى جانب مجموعة من القطب الجمجمة. وبالتالي من المهم جدا لإزالة كافة الانقاض الأنسجة مع مسحات القطن المعقم وتجفيف سطح الجمجمة. ثانيا ، قدرة الصفيف PBM التي يمكن أن تلتصق على سطح الجمجمة هو القوة فان دير فال. يقترح تطبيق قطرة من مياه الصنبور على الجمجمة لبناء طبقة المياه قبل ان يتم تطبيق PBM – الصفيف إلى الجمجمة. ثالثا ، اللزوجة حق الاسمنت الأسنان مهم جدا. إذا كان سيلان جدا ، قد يكون بناء طبقة عازلة تحت الصفيف PBM. إذا كانت كثيفة جدا ، فإن سقوط الاسمنت الأسنان بسهولة وبصرف النظر عن الجمجمة بسبب وزنه. وأخيرا ، ينبغي زرعها على الأقل ثلاثة microscrews دعم على الجمجمة لجعل الاسمنت الأسنان بإحكام في الجمجمة. وmicroscrews دعم تصمد الاسمنت الأسنان وتأمين headstage ، وهو أمر ضروري على المدى الطويل الدراسة.
سيكون محدودا تطبيق الصفيف PBM لدراسة المزمن مع فئران بالغة نظرا لحجمها ووزنها. بناء على خبرتنا ، والفئران أثقل من 25 غراما كافية للاستخدام. كما مزيد من الطلبات ، من خلال مساحة فارغة بين فروع في الصفيف PBM لدينا ، يمكن للمرء أن أعرض الأقطاب الثانوية للتسجيل أو لغرض التشويق.
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
بدعم من منحة كيغالي (2E21510) ، البرنامج الوطني للعلماء الشرف من وزارة التربية والتعليم ، وبحوث التكنولوجيا الأصل برنامج لعلوم المخ من خلال مؤسسة البحوث الوطنية لكوريا الجنوبية التي تمولها وزارة التعليم والعلوم والتكنولوجيا (2010-0018944).
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| γ–butyrolactone | Sigma | H7629-500G |
References
- Choi, J. H., Koch, K. P., Poppendieck, W., Lee, M., Shin, H. S. High resolution Electroencephalography in Freely Moving Mice. J Neurophysiol. , .
- Lee, M., Shin, H. S., Choi, J. H. Simultaneous recording of brain activity and functional connectivity in the mouse brain. Conf Proc IEEE Eng Med Biol Soc. , 2934-2936 (2009).
