El uso de un flujo de goteo y la rotación del disco para reactores Staphylococcus aureus Análisis de Biofilm
Summary
Protocolos para la utilización de abrir las biopelículas de flujo del sistema de reactores de flujo por goteo y la rotación de los reactores de disco se presentan en detalle.
Abstract
La mayoría de los microbios en la naturaleza se piensa que existen como asociados en la superficie las comunidades en las biopelículas. 1 biofilms bacterianos están encerrados dentro de una matriz y unido a una formación de biopelículas de la superficie. 2 y el desarrollo son comúnmente estudiados en el laboratorio con sistemas de lotes, tales como placas de microtitulación o el flujo de sistemas, como el flujo de las células. Estas metodologías son útiles para la selección de bibliotecas mutante y químicas (placas de microtitulación) 3 o en crecimiento para la visualización de biofilms (células de flujo) 4. Aquí se presentan los protocolos detallados para el Staphylococcus aureus que crece en otros dos tipos de biofilms sistema de flujo: el flujo de goteo reactor biopelícula y el reactor de biofilm disco giratorio.
Goteo de reactores de biopelícula de flujo están diseñados para el estudio de las biopelículas se cultivan en condiciones de bajo cizallamiento. 5 El reactor de flujo de goteo consta de cuatro canales de prueba en paralelo, cada uno capaz de contener un microscopio estándar de vidrio de tamaño cupón de diapositivas, o un trozo de catéter o restricción. El reactor de flujo por goteo es ideal para el monitoreo de microsensores, los estudios generales de biofilm, las muestras de biofilm muestras criostáticas, alta producción de biomasa, material de las evaluaciones médicas y pruebas de mora en los dispositivos médicos. 6,7,8,9
El reactor de disco giratorio se compone de un disco de teflón que contienen huecos de cupones desprendibles. 10 Los cupones desprendibles de puede hacerse de cualquier material mecanizable. La parte inferior del disco giratorio contiene un imán de barra para permitir la rotación del disco de corte para crear la superficie del líquido a través de la superficie al ras-cupones. Todo el disco contiene 18 cupones se coloca en un recipiente de 1000 ml de vidrio del reactor brazo lateral. Un medio de cultivo líquido se distribuye a través del vaso, mientras que el disco es girado por un agitador magnético. Los cupones se retiran de la vasija del reactor y luego raspar para recoger la muestra de biofilm para un estudio más o imágenes de microscopía. Rotación de los reactores de disco están diseñados para las pruebas de laboratorio de la eficacia biocida, la eliminación de biopelículas, y el rendimiento de los materiales anti-incrustantes. 9,11,12,13
Protocol
Discussion
Biofilms cultivados en reactores diferentes a menudo tienen características diferentes y cada uno tiene diferentes aplicaciones del reactor. En este trabajo se describe el uso de dos reactores de biopelícula: un flujo de goteo reactor biopelícula y un reactor de disco giratorio. Goteo de reactores de flujo son útiles para el cultivo bajo las biopelículas de corte en una interfase aire-líquido y son adaptables a una variedad de condiciones. Los encontramos muy conveniente para los estudios en los que una gran canti…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
NIAID subvención K22AI081748.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Drip Flow Reactors | BioSurface Technologies Corporation | DFR 110 | ||
| Rotating Disk Reactors | BioSurface Technologies Corporation |
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