קולון Ascendens סטנט דלקת הצפק (CASP) - מודל סטנדרטי עבור אלח דם בטן Polymicrobial
Summary
קולון Ascendens סטנט דלקת הצפק (CASP) הוא מודל סטנדרטי ביותר עבור אלח דם בטן polymicrobial במכרסמים. מאמר זה מתאר את הליך כירורגי של CASP. המודל CASP גירסאותיה, לאפשר חקירה שיטתית של בעיות שונות לגבי הנושא של אלח דם.
Abstract
אלח דם נותרה בעיה מתמשכת על ביחידות לטיפול נמרץ בכל רחבי העולם. הבנת המנגנונים המורכבים של אלח דם היא תנאי מוקדם להקמת גישות טיפוליות חדשות בתחום זה. לכן, במודלים של בעלי חיים נדרשים כי הם מסוגלים לחקות את המחלה מקרוב האדם גם מספיק להתמודד עם שאלות מדעיות. קולון Ascendens סטנט דלקת הצפק (CASP) הוא מודל סטנדרטי ביותר עבור אלח דם בטן polymicrobial במכרסמים. במודל זה, סטנט קטן מוכנס בניתוח לתוך המעי הגס עולה של עכברים או חולדות המוביל דליפה מתמדת של חיידקים במעיים לתוך חלל הצפק. ההליך תוצאות bacteraemia, דלקת הצפק מערכתית, זיהום על ידי חיידקים במעיים איבר, ולשחרר מערכתי אלא גם מקומית של ציטוקינים תומכי ואנטי דלקתיים שונים. הקטלניות של CASP יכול להיות נשלט על ידי בקוטר של סטנט מוכנס. גרסה של מודל זה, CASP שנקרא עם התערבות (כספי), מעלה את האפשרות להסיר את הפוקוס ספיגה על ידי פעולה נוספת על פי נהלים משותפים הקלינית. CASP הוא מודל learnable בקלות לשחזור מאוד כי מקרוב מחקה את המסלול הקליני של אלח דם הבטן. הוא מוביל דרך ללמוד על שאלות מדעיות בתחומים שונים כגון: אימונולוגיה, infectiology, או ניתוח.
Protocol
Discussion
CASP הוא מודל polymicrobial של אלח דם בטן שעונה לקריטריונים הניחו ביותר עבור מודל אלח דם יקר: CASP ניתן לבצע חיות קטנות, הוא לשעתקו מאוד, לפקח בקלות על ידי פרמטרים סטנדרטיים, מספק טוב לקרוא את האפשרויות, וכן מקרוב מחקה במסגרות קליניות של בטן אלח דם. במחקר השוואתי יכולנו להראות כי CASP מוביל מפוזר עם דלקת הצפק מוקדם מערכתית בהתמדה ודלקת (תגובה מערכתית תסמונת דלקת), ואילו קשירת לנקב cecal ו (CLP) חושפת מודל של היווצרות מורסה התוך בטני ממושך עם ומשניות סימנים של דלקת מערכתית (1). הטכניקה של כספי מציג אפשרות לדמות את המסלול הקליני של הצפק עם תברואה ברציפות להתמקד כירורגית, המהווה את העיקרון הטיפולי החשוב ביותר אצל בני אדם. CASP יכול להיות מיושם על כל השאלות סביב אלח דם או דלקת הצפק ולכן הוא שימושי עבור כל התחומים העוסקים במחקר אלח דם, למשל אימונולוגיה, פרמקולוגיה, ניתוחים, תרופות לטיפול נמרץ ועוד מבחר של פרסומים הנוגעים בנושאים שונים של אלח דם באמצעות מודל CASP היא כדלקמן (14/01).
כאשר החל CASP, אחד צריך להיות מודע לכך בפועל כמה הוא הכרחי כדי לבצע את הפעולה בדיוק ובמהירות. ניסיון כירורגי עשוי להיות מועיל, אך לא נדרש. אנו ממליצים זיהוי של letality כפרמטר לביצוע נכון של CASP. אחד צריך להתחיל עם CASP 14G כמו סטנט גדול יותר קל לטפל מאשר רזה אחד. מנתח CASP מאומן הוא מסוגל לפעול אחד העכבר תוך 10 דקות. לפני תחילת כל ניסוי, אתה צריך לוודא שאתה ליד תקופה. כאשר אתה צבר קצת ניסיון עם ההליך הכירורגי, אתה צריך לנהל הקינטית הישרדות כדי לבדוק את היכולות שלך. 14G CASP צריך לגרום הקטלניות של 100%. למתחילים במעבדה שלנו יש להוכיח כי הם מסוגלים להפיק הקטלניות 100% עם CASP 14G לפני שהם מתחילים עם הניסויים. בנוסף, בקטריולוגיה ומדידות ציטוקינים יש לבצע כדי לוודא אלח דם. אם יש לך בעיות בהתחלה עם הצעדים microsurgical של CASP, השימוש בזכוכית מגדלת או מיקרוסקופ כירורגי עשוי להיות מועיל. אבל המנהלת, CASP יכול להתבצע גם בלי הכלים הללו. עבור שעתוק של שיעורי ההישרדות שלנו, זה הכרחי כי אותם חומרים, בעיקר סטנטים (BD Venflon, ראה להלן), משמשים. אחרת, וריאציות משמעותי של התוצאות אפשרי. בנוסף, אנו מציעים כי ייתכנו שינויים של התוצאות בהתאם, למשל, את האינדיבידואליות של המנתח. עם זאת, ההשפעה של גורמים כאלה צריך להיות קטן.
לסיכום, CASP הוא מודל מעשי, אלח דם פשוטה, לשחזור ובעל ערך המחקה מקרוב את המצב הקליני של אלח דם הבטן. לכן זה מתאים בכל תחומי המחקר אלח דם.
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
המחברים מודים ניקו Zantl, קלאוס פפר, ו ברנהרד הולצמן. מחקר זה נתמך על ידי Forschungsgemeinschaft דויטשה, בון-Bad Godesberg, גרמניה (GRK-840; וו 450/10-1).
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Narcotic fluid | Mix 0.5 mL Rompun with 4.0 mL Ketanest, and add 5.5 mL of saline solution (0.9%). For complete anesthesia, inject intraperitoneally 10 μL/g body weight | |||
| Rompun (20 mg/ml Xylazine) | Bayer AG 51368 Leverkusen, Germany | |||
| Ketanest (25mg/ml Esketamine) | Pfizer Pharma GmbH, 10785 Berlin, Germany | 647028001E | ||
| BD Venflon 18GA (1,2x45mm, 80ml/min) | BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ USA 07417 | 391457 | ||
| BD Venflon 16GA (1,7x45mm, 180ml/min) | BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ USA 07417 | 391455 | ||
| BD Venflon 14GA (2,0x45mm, 270ml/min) | BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ USA 07417 | 391456 | ||
| Catgut Polyester 4/0 white, non absorbable | Catgut GmbH, 08258 Markneukirchen, Germany | 17218113 | ||
| Mariderm black 7/0, non absorbable | Catgut GmbH, 08258 Markneukirchen, Germany | 18104900 |
References
- Maier, S., Traeger, T., Entleutner, M., Westerholt, A., Kleist, B., Huser, N., Holzmann, B., Stier, A., Pfeffer, K., Heidecke, C. D. Cecal ligation and puncture versus colon ascendens stent peritonitis: two distinct animal models for polymicrobial sepsis. Shock. 21, 505-511 (2004).
- Bougaki, M., Searles, R. J., Kida, K., Yu, J. D. e., Buys, E. S., Ichinose, F. NOS3 protects against systemic inflammation and myocardial dysfunction in murine polymicrobial sepsis. Shock. , (2009).
- Buras, J. A., Holzmann, B., Sitkovsky, M. Animal models of sepsis: setting the stage. Nat Rev Drug Discov. 4, 854-865 (2005).
- Busse, M., Traeger, T., Potschke, C., Billing, A., Dummer, A., Friebe, E., Kiank, C., Grunwald, U., Jack, R. S., Schutt, C., Heidecke, C. D., Maier, S., Broker, B. M. Detrimental role for CD4+ T lymphocytes in murine diffuse peritonitis due to inhibition of local bacterial elimination. Gut. 57, 188-195 (2008).
- Daubeuf, B., Mathison, J., Spiller, S., Hugues, S., Herren, S., Ferlin, W., Kosco-Vilbois, M., Wagner, H., Kirschning, C. J., Ulevitch, R., Elson, G. TLR4/MD-2 monoclonal antibody therapy affords protection in experimental models of septic shock. J Immunol. 179, 6107-6114 (2007).
- Entleutner, M., Traeger, T., Westerholt, A., Holzmann, B., Stier, A., Pfeffer, K., Maier, S., Heidecke, C. D. Impact of interleukin-12, oxidative burst, and iNOS on the survival of murine fecal peritonitis. Int J Colorectal Dis. 21, 64-70 (2006).
- Kerschen, E. J., Fernandez, J. A., Cooley, B. C., Yang, X. V., Sood, R., Mosnier, L. O., Castellino, F. J., Mackman, N., Griffin, J. H., Weiler, H. Endotoxemia and sepsis mortality reduction by non-anticoagulant activated protein. C. J Exp Med. 204, 2439-2448 (2007).
- Kiank, C., Koerner, P., Kessler, W., Traeger, T., Maier, S., Heidecke, C. D., Schuett, C. Seasonal variations in inflammatory responses to sepsis and stress in mice. Crit Care Med. 35, 2352-2358 (2007).
- Lustig, M. K., Bac, V. H., Pavlovic, D., Maier, S., Grundling, M., Grisk, O., Wendt, M., Heidecke, C. D., Lehmann, C. Colon ascendens stent peritonitis–a model of sepsis adopted to the rat: physiological, microcirculatory and laboratory changes. Shock. 28, 59-64 (2007).
- Traeger, T., Kessler, W., Assfalg, V., Cziupka, K., Koerner, P., Dassow, C., Breitbach, K., Mikulcak, M., Steinmetz, I., Pfeffer, K., Heidecke, C. D., Maier, S. Detrimental role of CC chemokine receptor 4 in murine polymicrobial sepsis. Infect Immun. 76, 5285-5293 (2008).
- Traeger, T., Kessler, W., Hilpert, A., Mikulcak, M., Entleutner, M., Koerner, P., Westerholt, A., Cziupka, K., Rooijen, N. v. a. n., Heidecke, C. D., Maier, S. Selective depletion of alveolar macrophages in polymicrobial sepsis increases lung injury, bacterial load and mortality but does not affect cytokine release. Respiration. 77, 203-213 (2009).
- Traeger, T., Mikulcak, M., Eipel, C., Abshagen, K., Diedrich, S., Heidecke, C. D., Maier, S., Vollmar, B. Kupffer cell depletion reduces hepatic inflammation and apoptosis but decreases survival in abdominal sepsis. Eur J Gastroenterol Hepatol. , (2010).
- Weighardt, H., Kaiser-Moore, S., Schlautkotter, S., Rossmann-Bloeck, T., Schleicher, U., Bogdan, C., Holzmann, B. Type I IFN modulates host defense and late hyperinflammation in septic peritonitis. J Immunol. 177, 5623-5630 (2006).
- Zantl, N., Uebe, A., Neumann, B., Wagner, H., Siewert, J. R., Holzmann, B., Heidecke, C. D., Pfeffer, K. Essential role of gamma interferon in survival of colon ascendens stent peritonitis, a novel murine model of abdominal sepsis. Infect Immun. 66, 2300-2309 (1998).
