Mezzo condizionato all'organo: mezzo generatore da cellule d'organo raccolte per studi sul cancro metastatico
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Piaseczny, M.M., et al.
Questo video descrive un metodo per generare un mezzo condizionato da organo derivato dal fegato del topo. Questo sistema modello può essere utilizzato per identificare e studiare fattori solubili derivati da organi e i loro effetti sul tropismo degli organi e sul comportamento metastatico delle cellule tumorali.
Protocol
1. Generazione di supporti condizionati al polmone e al cervello In una cappa sterile di coltura tissutale, invertire tre volte i tubi PBS contenenti polmone o cervello per rimuovere il sangue residuo dagli organi e aspirare PBS contenente sangue. Ripetere con PBS fresco freddo fino a quando la soluzione appare chiara senza prove di sangue. Posizionare polmoni e cervelli in piastre di petri di vetro separate da 60 mm2. Utilizzando due lame sterili di bisturi, polmoni tritare o cervell…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Materials
| 1x Phosphate-buffered saline | ThermoFisher Scientific | 10010-023 | Keep sterile |
| 60 mm2 glass petri dishes | Sigma-Aldrich | CLS7016560 | Keep sterile |
| DMEM:F12 | Life Technologies | 21331-020 | Warm in 37 °C water bath before use, keep sterile |
| Penicillin-Streptomycin (10,000 U/ ml) | Life Technologies | 15140-122 | Keep sterile |
| 50 ml conical tubes | Thermo Scientific (Nunc) | 339652 | Keep sterile |
| 0.22 μm syringe filters | Sigma-Aldrich | Z359904 | Keep sterile |
| 6-well tissue culture plates | Thermo Scientific (Nunc) | 140675 | Keep sterile |
| Scalpel blades | Fisher Scientific | S95937A | Keep sterile |
Cite This Article
Organ Conditioned Medium: Generating Medium from Harvested Organ Cells for Metastatic Cancer Studies. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20218, doi: (2023).