FITC-Dextran האכלה: שיטה לכמת חדירות מעיים C. אלגנים
Published: April 30, 2023
Abstract
מקור: Le, T.A.N., ואח ‘. מדידת ההשפעות של חיידקים וכימיקלים על חדירות המעיים של אלגנים Caenorhabditis. ג’יי ויס אקספ. (2019).
וידאו זה מציג שיטה של לדמיין ולמדוד את השלמות של לומן המעי C. elegans על ידי האכלת תולעים FITC שכותרתו dextran. פרוטוקול הדוגמה מציג את ההסתעפות שנעשתה עם תולעים 3,3′-diindolylmethane (דים) מטופלים ופתוגן.
Protocol
פרוטוקול זה הוא קטע מ Le et al, מדידת ההשפעות של חיידקים וכימיקלים על חדירות המעיים של אלגנים Caenorhabditis, J. Vis. Exp. (2019). הכנת לוחות NGM לבדיקת ההשפעות של כימ…
Representative Results
איור 1: ההשפעה של דים על חדירות המעיים של C. elegans האכיל P. aeruginosa. מיקרוסקופיה תמונות של תולעים מ (A. coli OP50 ללא האכלה FITC-dextran, (B) E. coli עם האכלה FITC-dextran, (C<…
Materials
| 3,3’-diindolylmethane | Sigma | D9568 | |
| 90×15 mm Petri dishes | SPL Life Sciences, South Korea | 10090 | |
| Bactor Agar | Beckton Dickinson | REF. 214010 | |
| Formaldehyde solution | Sigma | F1635 | |
| Caenorhabditis elegans N2 | Caenorhabditis Genetics Center (CGC) | Wild type | |
| Cholesterol | Sigma | C3045 | |
| Costa Assay Plate, 96 Well Black With Clear Flat Bottom Non-treated, No Lid Polystyrene | Corning Incorporated | REF. 3631 | |
| Dimethyl sulfoxide | Sigma | D2650 | |
| Escherichia coli OP50 | Caenorhabditis Genetics Center (CGC) | ||
| Fluorescein isothiocyanate – dextran | Sigma | FD10S | |
| Harmony software | PerkinElmer | verson 3.5 | |
| Magnesium sulfate heptahydrate | Fisher Bioreagents | BP2213-1 | |
| Fluoromount aqueous mounting medium | Sigma | F4680 | |
| Operetta CLS High-Content Analysis System | PerkinElmer | HH16000000 | |
| Peptone | Merck | EMD 1.07213.1000 | |
| Pseudomonas aeruginosa PA01 | Korean Collection for Type Culture | KCTC NO. 1637 | |
| Sodium Chloride | Fisher Bioreagents | BP358-1 | |
| Stereo Microscope | Nikon, Japan | SMZ800N |
Cite This Article
FITC-Dextran Feeding: A Method to Quantify Intestinal Permeability in C. elegans. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20167, doi: (2023).