Фиксация этанола и daPI окрашивание: метод визуализации ДНК в C. elegans

Published: April 30, 2023

Abstract

Источник: Кларк, E. K., и др. Манипуляция Ploidy в Caenorhabditis elegans. J. Vis. Exp. (2018).

Здесь мы описываем метод, используемый для визуализации геномной ДНК в фиксированных, нетронутых нематод. Видео включает в себя пример протокола для подсчета хроматина в неутилизованных C. elegans oocytes.

Protocol

Этот протокол является выдержкой из Кларк и др., Манипуляция Ploidy в Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2018). Тетраплоидные штаммы могут быть проверены путем подсчета количества хромосом в их неопыляемых ооцитах. Флуоресц?…

Materials

Dissecting Microscope Motic Microscopy SMZ171
Name Company Catalog Number Comments
Staining
Hoechst 33258, Pentahydrate Biotium 40045
DAPI Biotium 40011
Name Company Catalog Number Comments
Ethanol Fixation
Ethanol, Pure, 190 Proof (95%), USP Koptec, VWR 89125-166
Name Company Catalog Number Comments
M9 Buffer
Sodium chloride, Biotechnology Grade VWR 97061-278
Potassium phosphate, Monobasic Anhydrous Grade VWR 97062-346
Sodium phosphate, monobasic dihydrate Fisher Scientific AC271750025

Play Video

Cite This Article
Ethanol Fixation and DAPI Staining: A Method to Visualize DNA in C. elegans. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20136, doi: (2023).

View Video