Larval Lymph Drüsensektion: Isolierung des Drosophila Hämose-produzierenden Organs

Published: April 30, 2023

Abstract

Quelle: Reimels, T. A. und Pfleger, C.M. Methoden zur Untersuchung der Lymphdrüse und Hämozyten in Drosophila Larvae. J. Vis. (2016).

Dieses Video beschreibt die Drosophila-Lymphdrüse – die primäre Stelle der Hämatopoese in der Fliegenlarve – und zeigt ein Beispielprotokoll zur Sezieren und Montage des Organs für Immunhistochemie und fluoreszierende Bildgebung.

Protocol

Dieses Protokoll ist ein Auszug aus Reimels und Pfleger, Methods to Examine the Lymph Gland and Hemocytes in Drosophila Larvae, J. Vis. Exp. (2016). 1. Larval Lymph Drüsen-Immunhistochemie HINWEIS: Die Lymphdrüse befindet sich etwa ein Drittel Länge vom vorderen Ende einer Larve etwas unterhalb des Gehirns auf der Rückenseite. (Siehe Pfeil in Abbildung 1B.) Die Lymphdrü…

Representative Results

Abbildung 1: In Vivo Kristallzellmelanisierung. A) Larven wurden vor dem Erhitzen einzeln in PCR-Röhren platziert. Rote Pfeile zeigen Larven an, die sich nicht am unteren Rand der Rohre befinden. B) Ein typisches Kristallzell-Melanisationsmuster nach dem Erhitzen, das manchmal die Lymphdrüse offenbart (Pfeil; dorsale Seite gezeigt, vorderes ist links). Maßstabsleiste steht fü…

Materials

PBS tablets MP Biomedicals 2810305
dissecting dish Corning 7220-85
microcentrifuge tube Denville C2170
silicone dissecting pad, made from Sylgard 184 kit Krayden (distributed through Fisher) NC9644388 (Fisher catalog number) Made in petri dish by mixing components of Sylgard elastomer kit according to manufacturer instructions.
stereomicroscope Morrell Instruments (Nikon distributor) mna42000, mma36300 Nikon models SMZ1000 and SMZ645
tissue wipe VWR 82003-820
forceps Electron Microscopy Sciences 72700-DZ
p200 pipette Eppendorf 3120000054
formaldehyde Fisher BP531-500
Triton Fisher BP151-500
Tween 20 Fisher BP337-500
bovine serum albumin Rocky Mountain Biologicals BSA-BSH-01K
normal goat serum Sigma G9023-10ML
normal donkey serum Sigma D9663-10ML
200 proof ethanol VWR V1001
N-propyl gallate MP Biomedicals 102747
glycerol VWR EM-4750
DAPI (4',6-diamidino-2-phenylindole) Fisher 62248
microscope cover glass, 18 mm circular Fisher 12-545-100
glass microscope slides Fisher 22-034-980
24-well plate Corning 351147
disposable transfer pipet Fisher 13-711-9AM
fluorescence microscope Zeiss Axio Imager.Z1

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Cite This Article
Larval Lymph Gland Dissection: Isolating the Drosophila Hemocyte-Producing Organ. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20117, doi: (2023).

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