Multielectrode Array Opnames van de Vomeronasal Epithelium
Summary
Multielectrode array (MEA) opnames een methode voor het bestuderen van de elektrische activiteit van grote groepen neuronen. Hier presenteren we de details van een MEA voorbereiding om op te nemen van de muis vomeronasale epitheel, terwijl tegelijkertijd het stimuleren van het weefsel.
Abstract
Inzicht in neurale circuits vereist methoden om tegelijkertijd op te nemen van vele neuronen. Voor<em> In vitro</em> Studies, een op dit moment beschikbare technologie is planar multielectrode array (MEA) opname. Hier hebben we document het gebruik van MEA's om de muis te vomeronasale orgaan (VNO), die een essentiële rol speelt bij het opsporen van feromonen en sociale signalen via een diverse bevolking van de sensorische neuronen die honderden soorten receptoren te bestuderen. De combinatie van MEA opname met een robot vloeistof handler op chemische prikkels te leveren, kan de zintuiglijke reacties van een grote en diverse populatie van neuronen worden opgenomen. De voorbereiding laat ons toe om de intacte neuroepithelium van het VNO te verwijderen van de muis en met een batterij van chemicaliën of potentiële liganden te stimuleren, terwijl het toezicht op de elektrische activiteit van de neuronen gedurende enkele uren. Daarom is deze techniek dient als een bruikbare methode voor het beoordelen van ligand-activiteit en het verkennen van de eigenschappen van de receptor neuronen. We presenteren de technieken die nodig zijn om de vomeronasale epitheel, MEA opnemen en chemische stimulatie voor te bereiden.
Protocol
Discussion
Multielectrode reeks opnames laten ons de mogelijkheid om de gelijktijdige activiteit van een grote populatie van neuronen te controleren. Dit is een nuttig hulpmiddel voor het sonderen van de eigenschappen van een sensorisch systeem, met name het VNO. In tegenstelling tot de grote olfactorische systeem, het VNO detecteert stimuli in vloeibare fase. Daarnaast is de VNO is een heterogeen weefsel. Er zijn ongeveer 300 verschillende soorten receptoren in de muis een, vermoedelijk met een verschillende reactie pr…
Acknowledgements
We willen graag de leden van de Heilige Lab bedanken. Dit werk werd ondersteund door het Nationaal Instituut voor Doofheid en Communicatie Disorders (R01 DC005964 tot DE) en NSF IGERT 0548890 (HAA).
Experimenten op dieren werden uitgevoerd in overeenstemming met de Verenigde Staten Animal Welfare Acts en de National Institutes of Health richtlijnen en zijn goedgekeurd door de Washington University Dierverzorging en gebruik Comite.
References
- Dulac, C., Torelo, A. T. Molecular detection of pheromone signals in mammals: from genes to behaviour. Nat Rev Neurosci. 4, 551-562 (2003).
- Holy, T. E. Responses of Vomeronasal neurons to natural stimuli. Science. 289, 1569-1572 (2000).
- Nodari, F. Sulfated steroids as natural ligands of mouse pheromone-sensing neurons. J Neurosci. 28, 6407-6418 (2008).
