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क्रायो-इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी द्वारा सूक्ष्मनलिकाएं-प्रोटीन परिसरों का अध्ययन करने के लिए स्तनधारी कोशिकाओं से संशोधित सूक्ष्मनलिकाएं निकालना
JoVE Journal
Bioquímica
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JoVE Journal Bioquímica
Extracting Modified Microtubules from Mammalian Cells to Study Microtubule-Protein Complexes by Cryo-Electron Microscopy
DOI:

08:02 min

March 03, 2023

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Capítulos

  • 00:05Introduction
  • 00:43Cell Culture and Harvesting
  • 01:30Microtubule Extraction
  • 04:13Cryo-Electron Microscopy (EM) Grid Preparation
  • 06:16Results: Analyzing Microtubule-Protein Complexes
  • 07:34Conclusion

Summary

Tadução automática

यहां, हम स्तनधारी कोशिकाओं से अंतर्जात ट्यूबुलिन निकालने के लिए एक प्रोटोकॉल का वर्णन करते हैं, जिसमें विशिष्ट संशोधन के लिए समृद्ध सूक्ष्मनलिकाएं प्राप्त करने के लिए विशिष्ट सूक्ष्मनलिकाएं-संशोधित एंजाइमों की कमी या शामिल हो सकती है। फिर हम वर्णन करते हैं कि क्रायो-इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी के लिए ग्रिड तैयार करने के लिए निकाले गए सूक्ष्मनलिकाएं शुद्ध सूक्ष्मनलिकाएं-बाध्यकारी प्रोटीन से कैसे सजाई जा सकती हैं।

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