Здесь мы описываем протокол извлечения эндогенного тубулина из клеток млекопитающих, которые могут отсутствовать или содержать специфические ферменты, модифицирующие микротрубочки, для получения микротрубочек, обогащенных для конкретной модификации. Затем мы опишем, как экстрагированные микротрубочки могут быть украшены очищенными белками, связывающими микротрубочки, для получения сеток для криоэлектронной микроскопии.
Bak, J., Landskron, L., Brummelkamp, T. R., Perrakis, A. Extracting Modified Microtubules from Mammalian Cells to Study Microtubule-Protein Complexes by Cryo-Electron Microscopy. J. Vis. Exp. (193), e65126, doi:10.3791/65126 (2023).