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एकल-अणु फ्रेट का उपयोग करके झिल्ली रिसेप्टर्स के विरूपण गतिशीलता की कल्पना करना
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Bioquímica
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JoVE Journal Bioquímica
Visualizing the Conformational Dynamics of Membrane Receptors Using Single-Molecule FRET
DOI:

10:59 min

August 17, 2022

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Capítulos

  • 00:04Introduction
  • 01:04Slide and Coverslip Cleaning
  • 03:04mGluR2 Expression with Incorporated Unnatural Amino Acid, Fluorescent Labeling, and Extraction
  • 05:13Single-Molecule Flow Chamber Assembly and Functionalization
  • 06:23Microscope Setup and smFRET Data Acquisition
  • 07:47Data Analysis
  • 08:39Results: Analyzing Conformational Dynamics of Membrane Receptors Proteins
  • 10:11Conclusion

Summary

Tadução automática

यह अध्ययन अप्राकृतिक अमीनो एसिड (यूएए) निगमन के माध्यम से साइट-विशिष्ट लेबलिंग का उपयोग करके जी प्रोटीन-युग्मित रिसेप्टर्स (जीपीसीआर) पर एकल-अणु प्रतिदीप्ति अनुनाद ऊर्जा हस्तांतरण (एसएमफ्रेट) प्रयोगों को करने के लिए एक विस्तृत प्रक्रिया प्रस्तुत करता है। प्रोटोकॉल एसएमफ्रेट नमूना तैयारी, प्रयोगों और डेटा विश्लेषण के लिए एक चरण-दर-चरण मार्गदर्शिका प्रदान करता है।

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