É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
Capítulos
- 00:05Introduction
- 01:22P0 Virus Stock Generation
- 02:38P1 Virus Stock Generation and Large-Scale Infection
- 03:28Sf9 Purification of Kinesin-3 Motors
- 04:25Microtubule Polymerization and In Vitro Single-Molecule Motility Assay
- 05:22In Vitro Microtubule Gliding Assay
- 06:23Results: Analysis of Sf9-Purified Kinesin-3 Motor
- 07:24Conclusion
Denna studie beskriver rening av KIF1A (1-393LZ), en medlem av kinesin-3-familjen, med hjälp av Sf9-baculovirusuttryckssystem. In vitro-enmolekyl - och flermotorig glidanalys av dessa renade motorer uppvisade robusta rörlighetsegenskaper jämförbara med motorer från däggdjurscellslysat. Således är Sf9-baculovirussystemet mottagligt för att uttrycka och rena motorprotein av intresse.
