/
/
Enkeltmolekyleanalyse af Sf9 rensede superprocessive Kinesin-3-familiemotorer
É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
Capítulos
- 00:05Introduction
- 01:22P0 Virus Stock Generation
- 02:38P1 Virus Stock Generation and Large-Scale Infection
- 03:28Sf9 Purification of Kinesin-3 Motors
- 04:25Microtubule Polymerization and In Vitro Single-Molecule Motility Assay
- 05:22In Vitro Microtubule Gliding Assay
- 06:23Results: Analysis of Sf9-Purified Kinesin-3 Motor
- 07:24Conclusion
Denne undersøgelse beskriver oprensning af KIF1A (1-393LZ), et medlem af kinesin-3-familien, ved hjælp af Sf9-baculovirusekspressionssystem. In vitro enkeltmolekyle og multimotorisk glideanalyse af disse oprensede motorer udviste robuste bevægelighedsegenskaber, der kan sammenlignes med motorer fra pattedyrcellelysat. Således er Sf9-baculovirus-systemet egnet til at udtrykke og rense motorprotein af interesse.
