Journal
/
Bioquímica
/
Измерение скорости оборота белка в стареющих и неделящихся культивируемых клетках с помощью метаболической маркировки и масс-спектрометрии
JoVE Journal
Bioquímica
This content is Free Access.
JoVE Journal Bioquímica
Measurement of Protein Turnover Rates in Senescent and Non-Dividing Cultured Cells with Metabolic Labeling and Mass Spectrometry
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Измерение скорости оборота белка в стареющих и неделящихся культивируемых клетках с помощью метаболической маркировки и масс-спектрометрии

DOI:
10.3791/63835-v

•

08:52 min

•

April 06, 2022

•

, ,
1Laboratory of Genetics and Genomics, National Institute on Aging Intramural Research Program,National Institutes of Health, 2Translational Gerontology Branch, National Institute on Aging Intramural Research Program,National Institutes of Health

Capítulos

  • 00:05Introduction
  • 00:58Labeling of Cells Pulsed SILAC and Harvest of Lysates
  • 02:29In-Solution Trypsin Digestion and Sample Clean-Up with Solid-Phase Extraction (SPE)
  • 04:15Data-Dependent Acquisition Mass Spectrometry Analysis and Calculation of Protein Half-Lives
  • 06:31Results: Measurement of Protein Turnover Rates in Senescent and Non-Dividing Cultured Cells Using pSILAC Mass Spectrometry
  • 08:13Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Этот протокол описывает рабочий процесс метаболической маркировки стареющих и неделящихся клеток с помощью импульсного SILAC, нецелевого масс-спектрометрического анализа и упрощенного расчета периодов полураспада белка.

Tags

Keywords: Protein TurnoverSenescent CellsNon-dividing CellsMetabolic LabelingMass SpectrometrySILACProtein HomeostasisCellular StressAgingNeurodegenerative DiseaseLC-MSTrypsinUreaAmmonium BicarbonateDithiothreitolIodoacetamide

Article

Embed

ADICIONAR À PLAYLIST

Usage Statistics

Vídeos Relacionados

check_url/pt/63835?article_type=v

Без футляра Капиллярный электрофорез-масс-спектрометрии для Метаболический Профилирование биологических образцов
check_url/pt/63835?article_type=v

Времяразрешенная ионизацией электрораспылением водорода дейтерий Обмен масс-спектрометрии для изучения белка структуры и динамики
check_url/pt/63835?article_type=v

Разрешающая Affinity Очищенная Белковые комплексы от Синей Native ПААГ и белка корреляции профилирование
check_url/pt/63835?article_type=v

Масс-спектрометрия и люминогенные подходы, основанные на Охарактеризуйте Фазу I метаболических компетентности в<em> In Vitro</em> Клеточные культуры
check_url/pt/63835?article_type=v

Пробоподготовка для массы на основе спектрометрии идентификации RNA-связывая регионов
check_url/pt/63835?article_type=v

Глубокая протеома профилирование Изобарический маркировки, обширные жидкостная хроматография, масс-спектрометрии и при содействии программного обеспечения количественной оценки
check_url/pt/63835?article_type=v

Корректура и ДНК ремонт пробирного анализа единичных нуклеотидных расширение и MALDI-TOF масс-спектрометрии с помощью
check_url/pt/63835?article_type=v

Измерение и интерпретации показателей потребления кислорода в целом летать головы сегментов
check_url/pt/63835?article_type=v

Обнаружение мест убиквитирования белка путем обогащения пептида и масс-спектрометрии
check_url/pt/63835?article_type=v

НитропептидНое профилирование и идентификация Иллюстрировано Ангиотензином II

Read Article