Journal
/
Bioquímica
/
Meting van eiwitomloopsnelheden in senescente en niet-delende gekweekte cellen met metabole etikettering en massaspectrometrie
JoVE Journal
Bioquímica
This content is Free Access.
JoVE Journal Bioquímica
Measurement of Protein Turnover Rates in Senescent and Non-Dividing Cultured Cells with Metabolic Labeling and Mass Spectrometry
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Meting van eiwitomloopsnelheden in senescente en niet-delende gekweekte cellen met metabole etikettering en massaspectrometrie

DOI:
10.3791/63835-v

•

08:52 min

•

April 06, 2022

•

, ,
1Laboratory of Genetics and Genomics, National Institute on Aging Intramural Research Program,National Institutes of Health, 2Translational Gerontology Branch, National Institute on Aging Intramural Research Program,National Institutes of Health

Capítulos

  • 00:05Introduction
  • 00:58Labeling of Cells Pulsed SILAC and Harvest of Lysates
  • 02:29In-Solution Trypsin Digestion and Sample Clean-Up with Solid-Phase Extraction (SPE)
  • 04:15Data-Dependent Acquisition Mass Spectrometry Analysis and Calculation of Protein Half-Lives
  • 06:31Results: Measurement of Protein Turnover Rates in Senescent and Non-Dividing Cultured Cells Using pSILAC Mass Spectrometry
  • 08:13Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Dit protocol beschrijft de workflow voor metabole etikettering van senescente en niet-delende cellen met gepulste SILAC, ongerichte massaspectrometrie-analyse en een gestroomlijnde berekening van eiwithalfwaardetijden.

Tags

Keywords: Protein TurnoverSenescent CellsNon-dividing CellsMetabolic LabelingMass SpectrometrySILACProtein HomeostasisCellular StressAgingNeurodegenerative DiseaseLC-MSTrypsinUreaAmmonium BicarbonateDithiothreitolIodoacetamide

Article

Embed

ADICIONAR À PLAYLIST

Usage Statistics

Vídeos Relacionados

check_url/pt/63835?article_type=v

Sheathless capillaire elektroforese-massaspectrometrie voor metabole of Biological Samples
check_url/pt/63835?article_type=v

Tijdsgeresolveerde elektrosprayionisatie waterstof-deuterium Exchange Massaspectrometrie voor het bestuderen van Protein Structure en Dynamics
check_url/pt/63835?article_type=v

Het oplossen van Affiniteit gezuiverde eiwit complexen door Blue inheemse PAGE en Protein Correlatie Profiling
check_url/pt/63835?article_type=v

Massaspectrometrie en luminogene gebaseerde benaderingen voor karakteriseren Fase I Metabolic competentie van<em> In Vitro</em> Cell Cultures
check_url/pt/63835?article_type=v

Bereiding van de monsters voor de massa spectrometrie gebaseerde identificatie van RNA-bindende regio 's
check_url/pt/63835?article_type=v

Diepe Proteoom profilering door isobaar Labeling, uitgebreide vloeistofchromatografie, massaspectrometrie en Software-bijgewoonde kwantificering
check_url/pt/63835?article_type=v

Proeflezen en DNA Repair Assay met behulp van één Nucleotide uitbreiding en MALDI-TOF massa spectrometrie analyse
check_url/pt/63835?article_type=v

Meten en interpreteren van zuurstof verbruik geheel vliegen hoofd segmenten
check_url/pt/63835?article_type=v

Detectie van eiwitubiquitinatiesites door peptideverrijking en massaspectrometrie
check_url/pt/63835?article_type=v

Nitropeptide profilering en identificatie geïllustreerd door angiotensine II

Read Article