قياس معدلات دوران البروتين في الخلايا المستزرعة الشائخة وغير المنقسمة مع وضع العلامات الأيضية وقياس الطيف الكتلي

JoVE Journal
Bioquímica

This content is Free Access.

JoVE Journal Bioquímica

Measurement of Protein Turnover Rates in Senescent and Non-Dividing Cultured Cells with Metabolic Labeling and Mass Spectrometry

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

قياس معدلات دوران البروتين في الخلايا المستزرعة الشائخة وغير المنقسمة مع وضع العلامات الأيضية وقياس الطيف الكتلي

DOI:

10.3791/63835-v

•

08:52 min

•

April 06, 2022

•

Matthew Payea, Myriam Gorospe, Nathan Basisty

¹Laboratory of Genetics and Genomics, National Institute on Aging Intramural Research Program,National Institutes of Health, ²Translational Gerontology Branch, National Institute on Aging Intramural Research Program,National Institutes of Health

Capítulos

00:05Introduction
00:58Labeling of Cells Pulsed SILAC and Harvest of Lysates
02:29In-Solution Trypsin Digestion and Sample Clean-Up with Solid-Phase Extraction (SPE)
04:15Data-Dependent Acquisition Mass Spectrometry Analysis and Calculation of Protein Half-Lives
06:31Results: Measurement of Protein Turnover Rates in Senescent and Non-Dividing Cultured Cells Using pSILAC Mass Spectrometry
08:13Conclusion

Summary

Tadução automática

يصف هذا البروتوكول سير العمل لوضع العلامات الأيضية للخلايا الشائخة وغير المنقسمة باستخدام SILAC النبضي ، وتحليل مطياف الكتلة غير المستهدف ، وحساب مبسط لعمر نصف البروتين .

قياس معدلات دوران البروتين في الخلايا المستزرعة الشائخة وغير المنقسمة مع وضع العلامات الأيضية وقياس الطيف الكتلي

•

•

•

Capítulos

Summary

Tadução automática

Tags

Article

Embed

ADICIONAR À PLAYLIST

Usage Statistics

Vídeos Relacionados

Sheathless شعري الكهربائي-الطيف الكتلي لالاستقلابية من التنميط العينات البيولوجية

وقت حل التأين electrospray الهيدروجين، الديوتيريوم تبادل الطيف الكتلي لدراسة بنية البروتين وديناميكية

حل تقارب تنقية البروتين المجمعات التي كتبها Blue الأصلية PAGE والبروتين الارتباط التنميط

الطيف الكتلي والنهج القائم Luminogenic للتميز المرحلة الأولى الاستقلابية الكفاءة من<em> في المختبر</em> الثقافات خلية

إعداد نموذج لتحديد الهوية الجماعية على أساس قياس الطيف الكتلي للجيش الملكي النيبالي-ربط المناطق

التنميط البروتين العميق بوسم إيسوباريك وواسعة النطاق اللوني السائل والطيف الكتلي وساعدت برامج القياس الكمي

تصحيح التجارب المطبعية ومقايسة إصلاح الحمض النووي باستخدام ملحق النوكليوتيدات واحدة واستخدام TOF تحليل الطيف الكتلي

قياس وتفسير معدلات استهلاك الأوكسجين كلياً يطير رئيس قطاعات

الكشف عن مواقع اكتشاف البروتين من قبل إثراء الببتيد وقياس الطيف الكتلي

توصيف وتعريف الببتيد الموضحة من قبل أنجيوتنسين الثاني

Read Article