Journal
/
Biologia
/
Prøvepreparering ved 3D-korrelativ fokusert ionstrålefresing for høyoppløselig kryo-elektrontomografi
JoVE Journal
Biologia
This content is Free Access.
JoVE Journal Biologia
Sample Preparation by 3D-Correlative Focused Ion Beam Milling for High-Resolution Cryo-Electron Tomography

Prøvepreparering ved 3D-korrelativ fokusert ionstrålefresing for høyoppløselig kryo-elektrontomografi

DOI:
10.3791/62886-v

•

08:20 min

•

October 25, 2021

•

, , , ,
1Max Planck Institute of Biochemistry, 2Max Planck Institute for Biophysics, 3Fondazione Human Technopole

Capítulos

  • 00:04Introduction
  • 00:36Cryo-Fluorescence Light Microscopy (Cryo-FLM) of Plunge‐Frozen Grids with Cells
  • 01:51Focused Ion Beam (FIB) Milling
  • 05:47Correlative Transmission Electron Microscopy (TEM)
  • 07:02Results: Visualizing the Endocytic Protein Deposit in the Cell with Cryo‐ET
  • 07:38Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Her presenterer vi en rørledning for 3D-korrelativ fokusert ionstrålefresing for å veilede fremstillingen av cellulære prøver for kryo-elektrontomografi. 3D-posisjonen til fluorescerende merkede proteiner av interesse bestemmes først ved kryofluorescensmikroskopi, og deretter målrettet for fresing. Protokollen er egnet for pattedyr-, gjær- og bakterieceller.

Tags

Keywords: 3D-correlative FIB MillingCryo-electron TomographyCryo-fluorescence MicroscopyCryo-FIB-SEMSEM Grid OverviewFLM-SEM CorrelationIon Beam ImagingCellular Ultrastructure

Article

Embed

ADICIONAR À PLAYLIST

Usage Statistics

Vídeos Relacionados

check_url/pt/62886?article_type=v

MALDI Sample Preparation: the Ultra Thin Layer Method
check_url/pt/62886?article_type=v

Ved hjelp av høyoppløselig CT for å visualisere tredimensjonale struktur og funksjon Plant vasculature
check_url/pt/62886?article_type=v

Cryo-elektron mikroskopi prøven forberedelse ved hjelp av en Focused Ion Beam
check_url/pt/62886?article_type=v

Gjøre og ikke gjøre av Cryo-elektronmikroskopi: En Primer på Prøvepreparering og High Quality datainnsamling for Macromolecular 3D Rekonstruksjon
check_url/pt/62886?article_type=v

Prøvepreparering for Mass Cytometry Analyse
check_url/pt/62886?article_type=v

Utarbeidelse og Observasjon av Thick biologiske prøver av Scanning Transmission Electron Tomography
check_url/pt/62886?article_type=v

Isolering av Intakt Mitokondrier fra Skeletal Muscle av differensialsentrifugering for høy oppløsning respirometri Målinger
check_url/pt/62886?article_type=v

Eksempel forberedelse og bildebehandling for Exosomes av overføring elektronmikroskop
check_url/pt/62886?article_type=v

Visualisering av DNA komprimering i Cyanobakterie av høyspent Cryo-elektron tomografi
check_url/pt/62886?article_type=v

Miniatyriserte eksempel forberedelse til overføring elektronmikroskop

Read Article