/

/

近接ライゲーションアッセイを用いた異流体せん断応力条件下でのTGFβ/BMP/SMADシグナル伝達の可視化と定量化

JoVE Journal
Bioquímica

É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou comece sua avaliação gratuita.

JoVE Journal Bioquímica

Visualization and Quantification of TGFβ/BMP/SMAD Signaling under Different Fluid Shear Stress Conditions using Proximity-Ligation-Assay

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

近接ライゲーションアッセイを用いた異流体せん断応力条件下でのTGFβ/BMP/SMADシグナル伝達の可視化と定量化

DOI:

10.3791/62608-v

•

11:38 min

•

September 14, 2021

•

Paul-Lennard Mendez², Leon Obendorf, Petra Knaus

¹Institute for Chemistry and Biochemistry,Freie Universität Berlin, ²International Max-Planck Research School for Biology and Computation

Capítulos

00:05Introduction
00:40Cell Culture and Fluid Shear Stress Exposure
02:55Fixation
04:58Blocking and Incubation with Primary Antibody
06:28Incubation with PLA Probe and Ligation
07:34Amplification and Mounting
09:14Results: Effect of Shear Stress on the SMAD Protein Interactions
11:02Conclusion

Summary

Tadução automática

ここでは、病理的および生理的な流体せん断ストレス条件に曝露した内皮細胞における近接ライゲーションアッセイ(PLA)を用いて、複数のSMAD複合体を同時に可視化・解析するプロトコルを確立する。

Tags

Keywords: TGF-β/BMP/SMAD Signaling Proximity Ligation Assay Fluid Shear Stress Microfluidic Flow Channels HUVEC Cells Transcription Factor Complexes Vascular Biology

Article

Embed

ADICIONAR À PLAYLIST

Usage Statistics

Vídeos Relacionados

ニトロセルロース結合アッセイを用いて細菌ヒスチジンキナーゼ自己リン酸化の定量化

共免疫沈降により核および細胞質画分中のタンパク質間相互作用の可視化と<em>その場で</em>近接ライゲーションアッセイ

酸に不安定な保護基を保持するのに適したNi-シッフ塩基錯体の使用条件の加水分解

近接ライゲーションアッセイを用いた懸濁細胞培養におけるDNA損傷誘発タンパク質複合体の検出と可視化

酵母細胞の酸化ストレスに対するタンパク質凝集の影響の評価

その場で近接結紮アッセイを用いたタンパク質アイソフォームの Heterodimerization の検出

多重共免疫沈殿を用いたタンパク質相互作用ネットワークダイナミクスの定量化

厳密嫌気性/無酸素条件下での微生物の培養のための培地製剤

細胞および組織におけるコエンザイムAの定量

免疫蛍光を用いたTNBS誘発クローン病を用いたマウスの結腸におけるエストロゲン受容体の可視化

Read Article