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Fluorimetría de barrido nanodes diferencial para el cribado en el descubrimiento de plomo basado en fragmentos
JoVE Journal
Bioquímica
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JoVE Journal Bioquímica
Nano-Differential Scanning Fluorimetry for Screening in Fragment-based Lead Discovery
DOI:

06:26 min

May 16, 2021

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Capítulos

  • 00:04Introduction
  • 00:35Plate Preparation
  • 01:06Fragment Nano-Dispensing by the Mosquito Robot
  • 02:01Fragment Dispensing
  • 03:17Preparing the Prometheus
  • 04:25Fluorescence Scan and Thermal Denaturation
  • 05:04Results: Fragment Screening
  • 05:49Conclusion

Summary

Tadução automática

El monitoreo de los cambios en la temperatura de fusión de una proteína objetivo(es decir,el ensayo de cambio térmico, TSA) es un método eficiente para examinar bibliotecas de fragmentos de unos pocos cientos de compuestos. Presentamos un protocolo TSA que implementa la fluorimetría de escaneo nano-diferencial asistida por robótica (nano-DSF) para monitorear la fluorescencia intrínseca de triptófano y la retrodisparión de luz para la detección de fragmentos.

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