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Fluorimetria a scansione nano-differenziale per lo screening nella scoperta di piombo basata su frammenti
JoVE Journal
Bioquímica
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JoVE Journal Bioquímica
Nano-Differential Scanning Fluorimetry for Screening in Fragment-based Lead Discovery
DOI:

06:26 min

May 16, 2021

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Capítulos

  • 00:04Introduction
  • 00:35Plate Preparation
  • 01:06Fragment Nano-Dispensing by the Mosquito Robot
  • 02:01Fragment Dispensing
  • 03:17Preparing the Prometheus
  • 04:25Fluorescence Scan and Thermal Denaturation
  • 05:04Results: Fragment Screening
  • 05:49Conclusion

Summary

Tadução automática

Il monitoraggio delle variazioni della temperatura di fusione di una proteinabersaglio (ad es.saggio di spostamento termico, TSA) è un metodo efficiente per lo screening di librerie di frammenti di poche centinaia di composti. Presentiamo un protocollo TSA che implementa la fluorimetria a scansione nano-differenziale assistita da robotica (nano-DSF) per il monitoraggio della fluorescenza intrinseca del triptofano e la retrodepersione della luce per lo screening dei frammenti.

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