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Nano-Differential-Scanning-Fluorimetrie für das Screening in der fragmentbasierten Lead-Discovery
JoVE Journal
Bioquímica
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JoVE Journal Bioquímica
Nano-Differential Scanning Fluorimetry for Screening in Fragment-based Lead Discovery
DOI:

06:26 min

May 16, 2021

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Capítulos

  • 00:04Introduction
  • 00:35Plate Preparation
  • 01:06Fragment Nano-Dispensing by the Mosquito Robot
  • 02:01Fragment Dispensing
  • 03:17Preparing the Prometheus
  • 04:25Fluorescence Scan and Thermal Denaturation
  • 05:04Results: Fragment Screening
  • 05:49Conclusion

Summary

Tadução automática

Die Überwachung von Änderungen der Schmelztemperatur eines Zielproteins(z. B.Thermal Shift Assay, TSA) ist eine effiziente Methode zum Screening von Fragmentbibliotheken von einigen hundert Verbindungen. Wir präsentieren ein TSA-Protokoll, das eine robotergestützte Nano-Differential Scanning Fluorimetry (Nano-DSF) zur Überwachung der intrinsischen Tryptophanfluoreszenz und der Lichtrückstreuung für das Fragmentscreening implementiert.

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