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Fluorimétrie à balayage nano-différentiel pour le criblage dans la découverte de plomb à base de fragments
JoVE Journal
Bioquímica
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JoVE Journal Bioquímica
Nano-Differential Scanning Fluorimetry for Screening in Fragment-based Lead Discovery
DOI:

06:26 min

May 16, 2021

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Capítulos

  • 00:04Introduction
  • 00:35Plate Preparation
  • 01:06Fragment Nano-Dispensing by the Mosquito Robot
  • 02:01Fragment Dispensing
  • 03:17Preparing the Prometheus
  • 04:25Fluorescence Scan and Thermal Denaturation
  • 05:04Results: Fragment Screening
  • 05:49Conclusion

Summary

Tadução automática

La surveillance des changements dans la température de fusion d’une protéine cible(c.-à-d.essai de décalage thermique, TSA) est une méthode efficace pour filtrer les bibliothèques de fragments de quelques centaines de composés. Nous présentons un protocole TSA mettant en œuvre la fluorimétrie à balayage nano-différentiel assistée par robotique (nano-DSF) pour surveiller la fluorescence intrinsèque du tryptophane et la rétrodiffusion de la lumière pour le criblage des fragments.

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