Journal
/
Química
/
Overvåking av protein-ligand interaksjoner i menneskelige celler ved sanntid kvantitativ in-cell NMR ved hjelp av en høy celletetthet bioreaktor
JoVE Journal
Química
This content is Free Access.
JoVE Journal Química
Monitoring Protein-Ligand Interactions in Human Cells by Real-Time Quantitative In-Cell NMR using a High Cell Density Bioreactor

Overvåking av protein-ligand interaksjoner i menneskelige celler ved sanntid kvantitativ in-cell NMR ved hjelp av en høy celletetthet bioreaktor

DOI:
10.3791/62323-v

•

10:25 min

•

March 09, 2021

•

,
1Magnetic Resonance Center − CERM,University of Florence, 2Consorzio Interuniversitario Risonanze Magnetiche di Metalloproteine − CIRMMP, 3Neurofarba Department,University of Florence

Capítulos

  • 00:05Introduction
  • 00:47Bioreactor Setup
  • 01:34Preparation of the Cell Sample
  • 04:03Bioreactor Operation and NMR Experiments
  • 06:00MCR-ALS Analysis
  • 08:06Results: Monitoring Protein-Ligand Interactions by Real-Time Quantitative In-Cell NMR
  • 09:48Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Denne protokollen beskriver oppsettet av en NMR bioreaktor for å holde innkapslede menneskelige celler levedyktige i opptil 72 timer, etterfulgt av tids løst in-cell NMR datainnsamling og analyse. Metodikken brukes til å overvåke intracellulære protein-ligand interaksjoner i sanntid.

Tags

In-cell NMRProtein-ligand InteractionsHuman CellsBioreactorReal-time MonitoringProtein StructureProtein FunctionConformational ChangesChemical ChangesIsotope LabelingHEK 293T CellsAgarose ThreadsCell EmbeddingFlow UnitNMR TubeTemperature ControlCell ViabilityCell Metabolism

Article

Embed

ADICIONAR À PLAYLIST

Usage Statistics

Vídeos Relacionados

Vilkårlige Metabolomics fra biologiske kilder Bruke UltraPerformance væskekromatografi-High Resolution massespektrometri (UPLC-HRMS)

Kvantitativ og kvalitativ undersøkelse av Partikkel-partikkel interaksjoner ved hjelp av kolloidalt Probe Nanoscopy

Sanntidsovervåking av reaksjoner utføres ved hjelp av kontinuerlig flyt Foredling: Fremstilling av 3-Acetylcoumarin som eksempel

Radiomerking og Kvantifisering av Cellular Nivåer av Phosphoinositides ved HPLC-coupled Flow Scintillation

Oppløsning Dynamic Nuclear Polarisering Instrumentering for Real-time enzymatiske reaksjonen rate målinger av NMR

Flow-mønster Guidet Fabrikasjon av høy tetthet Barcode Antistoff Microarray

Rapid Høy throughput Arter Identifikasjon av Botanisk Material Bruke direkte analyse i Real Time High Resolution massespektrometri

Kapillær elektroforese til Monitor Peptide Negl på Chitosan Filmer i sanntid

Sanntid pusten analyse ved hjelp av sekundære Nanoelectrospray Ionization koblet til høy oppløsning massespektrometri

Analysere Protein arkitekturer og Protein-Ligand komplekser av integrerende strukturelle massespektrometri

Read Article