Journal
/
Química
/
使用高细胞密度生物反应器通过实时定量细胞内 NMR 监测人细胞中蛋白质-配体相互作用
JoVE Journal
Química
This content is Free Access.
JoVE Journal Química
Monitoring Protein-Ligand Interactions in Human Cells by Real-Time Quantitative In-Cell NMR using a High Cell Density Bioreactor
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

使用高细胞密度生物反应器通过实时定量细胞内 NMR 监测人细胞中蛋白质-配体相互作用

DOI:
10.3791/62323-v

•

10:25 min

•

March 09, 2021

•

,
1Magnetic Resonance Center − CERM,University of Florence, 2Consorzio Interuniversitario Risonanze Magnetiche di Metalloproteine − CIRMMP, 3Neurofarba Department,University of Florence

Capítulos

  • 00:05Introduction
  • 00:47Bioreactor Setup
  • 01:34Preparation of the Cell Sample
  • 04:03Bioreactor Operation and NMR Experiments
  • 06:00MCR-ALS Analysis
  • 08:06Results: Monitoring Protein-Ligand Interactions by Real-Time Quantitative In-Cell NMR
  • 09:48Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

该协议描述了NMR生物反应器的设置，以保持封装的人类细胞存活长达72小时，然后进行时间分辨的细胞内NMR数据采集和分析。该方法用于实时监测细胞内蛋白质 - 配体相互作用。

Tags

In-cell NMRProtein-ligand InteractionsHuman CellsBioreactorReal-time MonitoringProtein StructureProtein FunctionConformational ChangesChemical ChangesIsotope LabelingHEK 293T CellsAgarose ThreadsCell EmbeddingFlow UnitNMR TubeTemperature ControlCell ViabilityCell Metabolism

Article

Embed

ADICIONAR À PLAYLIST

Usage Statistics

Vídeos Relacionados

不相关的代谢组学，生物源使用超高效液相色谱 - 高分辨质谱（UPLC-HRMS）

粒子粒子相互作用采用胶体探针纳米显微定量和定性检查

反应执行使用连续流处理的实时监控：3 - 乙酰基香豆素的制备为例

放射性标记和磷酸肌醇的细胞水平的定量高效液相色谱耦合流动闪烁

溶出动态核极化仪器用NMR实时酶反应速率测量

高密度条码抗体芯片的水流模式的指导下制作

植物材料的快速高通量物种鉴定实时高分辨质谱法直接分析

毛细管电泳监视肽接枝壳聚糖膜实时

利用二次 Nanoelectrospray 电离耦合高分辨质谱的实时呼吸分析

综合结构质谱分析蛋白质结构和蛋白质配体配合物

Read Article