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Un saggio di imaging a singola molecola in vitro per l'analisi della cinetica di traduzione dipendente dal cappuccio
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Capítulos
- 00:05Introduction
- 00:51Equipment Preparation
- 03:113’-End Biotinylated mRNA Immobilization
- 05:20Translation Mix Assembly and Delivery
- 07:24Results: Analyses for Saccharomyces cerevisiae Translation of a Firefly Luciferase-encoding mRNA
- 09:12Conclusion
Il monitoraggio dei singoli eventi di traduzione consente studi cinetici ad alta risoluzione sui meccanismi di traduzione dipendenti dal cappuccio. Qui dimostriamo un saggio a singola molecola in vitro basato sulle interazioni di imaging tra anticorpi etichettati fluorescentmente e peptidi nascenti etichettati epitopi. Questo metodo consente la caratterizzazione a singola molecola della cinetica di iniziazione e allungamento peptidico durante la traduzione attiva in vitro dipendente dal cappuccio.
