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Un essai in vitro d’imagerie à molécule unique pour l’analyse de la cinétique de traduction cap-dépendante
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Bioquímica
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JoVE Journal Bioquímica
An In Vitro Single-Molecule Imaging Assay for the Analysis of Cap-Dependent Translation Kinetics
DOI:

09:52 min

September 15, 2020

, ,

Capítulos

  • 00:05Introduction
  • 00:51Equipment Preparation
  • 03:113’-End Biotinylated mRNA Immobilization
  • 05:20Translation Mix Assembly and Delivery
  • 07:24Results: Analyses for Saccharomyces cerevisiae Translation of a Firefly Luciferase-encoding mRNA
  • 09:12Conclusion

Summary

Tadução automática

Le suivi des événements de traduction individuels permet des études cinétiques à haute résolution des mécanismes de traduction dépendant du plafond. Ici nous démontrons un essai in vitro d’une seule molécule basé sur des interactions de formation image entre les anticorps fluorescents étiquetés et les peptides naissants épitope-marqués. Cette méthode permet la caractérisation à molécule unique de la cinétique d’initiation et d’élongation peptidique lors de la traduction active in vitro dépendante du capuchon.

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