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RT-PCR quantitativo de alta produtividade em amostras de elegans C. single e bulk usando tecnologia nanofluidica
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High-Throughput Quantitative RT-PCR in Single and Bulk C. elegans Samples Using Nanofluidic Technology

RT-PCR quantitativo de alta produtividade em amostras de elegans C. single e bulk usando tecnologia nanofluidica

DOI:
10.3791/61132-v

•

08:19 min

•

May 28, 2020

•

, , , , , , ,
1Babraham Institute, 2Gurdon Institute,University of Cambridge, 3Department of Genetics,University of Cambridge, 4Wellcome Trust Genome Campus,Wellcome Trust Sanger Institute, 5Laboratory of Virology and Infectious Disease,The Rockefeller University

Capítulos

  • 00:05Introduction
  • 00:46Worm-to-CT Worm Lysis
  • 02:08Reverse Transcription (RT) for Bulk Samples
  • 02:38Target Specific Preamplification
  • 03:19Exonuclease I Treatment
  • 03:53Sample Mix Preparation
  • 04:48Nanofluidic Chip Priming and Loading
  • 06:00Results: Representative Worm-to-CT Analysis
  • 07:45Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Neste artigo é descrito um protocolo de alto rendimento para determinação rápida e confiável dos níveis de expressão genética em amostras de C. elegans única ou a granel. Este protocolo não requer isolamento de RNA e produz cDNA diretamente a partir de amostras. Ele pode ser usado em conjunto com plataformas qPCR nanofluidas nanofluidas de alto rendimento.

Tags

RT-qPCRC. ElegansNanofluidic TechnologyHigh-throughputSingle-sampleBulk-sampleRNA IsolationLysis BufferReverse TranscriptionPre-amplificationGene ExpressionInterindividual Variability

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