É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo. Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
NEMO'nun IKK bağlayıcı alanının üretimi, kristalizasyonu ve Yapı Tayini
Capítulos
- 00:04Título
- 01:12Large Scale Expression of Histidine-6 (His6)-Tagged Nuclear Factor-kappa-B Essential Modulator Crystallography Construct (NEMO-EEAA)
- 02:33His6-Tagged NEMO-EEAA Purification
- 04:42His6 Tag Cleavage and Purification
- 07:09Sparse Matrix Screening
- 08:23Seed Stock Generation
- 09:00Crystal Looping
- 09:43X-Ray Data Processing and Structure Solution
- 10:38Results: Representative Production, Crystallization, and Structure Determination of the IKK-Binding Domain of NEMO
- 12:28Conclusion
NEMO'nun IKK-bağlayıcı alanının x-ışını kristalografisi ile yapı tayinine ilişkin protokolleri açıklıyoruz. Bu yöntemler arasında protein ekspresyonu, saflaştırma ve karakterizasyonunun yanı sıra başarılı kristal optimizasyonu ve proteinin sınırsız formunda yapı tespiti stratejileri yer almaktadır.
