Journal
/
Genética
/
Generering av definierade genomiska modifikationer med CRISPR-CAS9 i humana pluripotenta stamceller
JoVE Journal
Genética
É necessária uma assinatura da JoVE para visualizar este conteúdo.  Faça login ou comece sua avaliação gratuita.
JoVE Journal Genética
Generation of Defined Genomic Modifications Using CRISPR-CAS9 in Human Pluripotent Stem Cells
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Generering av definierade genomiska modifikationer med CRISPR-CAS9 i humana pluripotenta stamceller

DOI:
10.3791/60085-v

•

09:04 min

•

September 25, 2019

•

, , ,
1Center for Cellular and Molecular Therapeutics,The Children’s Hospital of Philadelphia, 2Department of Pathology and Laboratory Medicine,The Children’s Hospital of Philadelphia, 3Department of Pathology and Laboratory Medicine,University of Pennsylvania

Capítulos

  • 00:04Título
  • 01:19Test gRNA (GuidE RNA) Cutting Efficiency
  • 03:50Clone Screening
  • 04:51Transfection Setup
  • 06:07Checking for Mutations in Single Colonies
  • 07:11Results: Cutting Efficiency, and Generation and Screening of Mutations
  • 08:10Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Detta protokoll ger en metod för att underlätta generering av definierade heterozygot eller homozygot nukleotidförändringar med hjälp av CRISPR-CAS9 i humana pluripotenta stamceller.

Tags

CRISPR-Cas9Human Pluripotent Stem CellsIsogenic LinesHeterozygous MutationsGene FunctionDisease ModelingColony PickingFluorescence-activated Cell SortingMEFsROCK Inhibitor

Article

Embed

ADICIONAR À PLAYLIST

Usage Statistics

Vídeos Relacionados

Med hjälp av en fluorescerande PCR-kapillärgelelektrofores Technique att genotypa CRISPR / Cas9-medierad Knockout mutanter i en hög kapacitet Format

Urval-beroende och oberoende generering av CRISPR / Cas9-medierade genknockouts i däggdjursceller

Primordiala könsceller Transplantation för CRISPR/Cas9-baserade bli ledande i Xenopus

Immunfärgning för DNA ändringar: tillämpad analys av Confocal bilder

CRISPR/Cas9-medierad riktade Integration In Vivo som använder en homologi-medierad slutet att gå-baserad strategi

Högeffektiva gen störningar av murina och mänskliga hematopoetiska stamceller av CRISPR/Cas9

En snabb och lättköpt Pipeline för generera genomisk punkt mutanter i C. elegans med CRISPR/Cas9 Ribonucleoproteins

CRISPR/Cas9 gen redigering till göra villkorlig mutanter av humana malariaparasiten P. falciparum

Endogen Protein taggning i mänskliga inducerade pluripotenta stamceller med CRISPR/Cas9

Lentiviral Vector plattform för effektiv distribution av epigenomet-redigeringsverktyg i mänskliga inducerade pluripotenta stamceller-derived sjukdomsmodeller

Read Article