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Ein-Molekül Förster Resonanz Energietransfermethoden für Die Echtzeit-Untersuchung der Holliday Junction Resolution von GEN1
JoVE Journal
Genética
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JoVE Journal Genética
Single-Molecule Förster Resonance Energy Transfer Methods for Real-Time Investigation of the Holliday Junction Resolution by GEN1
DOI:

11:27 min

September 18, 2019

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Capítulos

  • 00:04Título
  • 01:22Flow Cell Preparation
  • 03:01Single-Molecule Förster Resonance Energy Transfer (smFRET) Experiments
  • 06:25Sm-FRET Data Analysis
  • 07:10Two-Color Alternating Excitation (ALEX) FRET Experiment and Analysis
  • 08:24Results: Representative Real-Time HJ Resolution Investigation
  • 10:13Conclusion

Summary

Tadução automática

Hier wird ein Protokoll zur Durchführung der einmolekularen Förster-Resonanzenergieübertragung zur Untersuchung der HJ-Auflösung vorgestellt. Zur Bestimmung der Dissoziationskonstanten wird eine zweifarbige Wechselanregung verwendet. Einfarbigezeitraffe smFRET wird dann in Echtzeit-Spaltungstests angewendet, um die Verweilzeitverteilung vor hj-Auflösung zu erhalten.

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