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कैस9 प्रोटीन-GRNA परिसरों के इलेक्ट्रोपोरेशन के माध्यम से एक्सोटोटल स्पाइनल कॉर्ड न्यूरल स्टेम सेल का डायरेक्ट जीन नॉक-आउट
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Direct Gene Knock-out of Axolotl Spinal Cord Neural Stem Cells via Electroporation of CAS9 Protein-gRNA Complexes
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कैस9 प्रोटीन-GRNA परिसरों के इलेक्ट्रोपोरेशन के माध्यम से एक्सोटोटल स्पाइनल कॉर्ड न्यूरल स्टेम सेल का डायरेक्ट जीन नॉक-आउट

DOI:
10.3791/59850-v

•

09:10 min

•

July 09, 2019

•

, , , ,
1School of Life Sciences,South China Normal University, 2The Research Institute of Molecular Pathology (IMP),Vienna Biocenter (VBC), 3Institute for Brain Research and Rehabilitation (IBRR),South China Normal University

Capítulos

  • 00:04Título
  • 01:16CAS9-gRNA Ribonucleoprotein Mixture and Agarose Plate Preparation
  • 02:33Electroporator Configuration and Glass Microinjection Capillary Loading
  • 04:09Pneumatic Pump Configuration
  • 04:37CAS9-gRNA Ribonucleoprotein Mixture Injection
  • 06:05Electroporation
  • 06:45Knock-Out Efficiency Assessment
  • 07:25Results: Representative Knock-Out Effects in Axolotl Spinal Cord Neural Stem Cells
  • 08:33Conclusion

Summary

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यहाँ प्रस्तुत एक प्रोटोकॉल है समय और अंतरिक्ष प्रतिबंधित जीन दस्तक प्रदर्शन करने के लिए axolotl रीढ़ की हड्डी में CAS9-GRNA परिसर रीढ़ की हड्डी केंद्रीय नहर में इंजेक्शन द्वारा जिसके बाद electroporation.

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Keywords: AxolotlSpinal CordNeural Stem CellsGene Knock-outElectroporationCAS9GRNARegenerationMolecular MechanismsNeural Stem Cell FunctionSpinal Cord InjuryAgarose Electroporation PlatePoring PulseTransfer Pulse

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