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Knock-out gene diretto delle cellule staminali neurali del midollo spinale ad axolotl tramite elettroporazione dei complessi CAS9 Protein-gRNA
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Direct Gene Knock-out of Axolotl Spinal Cord Neural Stem Cells via Electroporation of CAS9 Protein-gRNA Complexes
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Knock-out gene diretto delle cellule staminali neurali del midollo spinale ad axolotl tramite elettroporazione dei complessi CAS9 Protein-gRNA

DOI:
10.3791/59850-v

•

09:10 min

•

July 09, 2019

•

, , , ,
1School of Life Sciences,South China Normal University, 2The Research Institute of Molecular Pathology (IMP),Vienna Biocenter (VBC), 3Institute for Brain Research and Rehabilitation (IBRR),South China Normal University

Capítulos

  • 00:04Título
  • 01:16CAS9-gRNA Ribonucleoprotein Mixture and Agarose Plate Preparation
  • 02:33Electroporator Configuration and Glass Microinjection Capillary Loading
  • 04:09Pneumatic Pump Configuration
  • 04:37CAS9-gRNA Ribonucleoprotein Mixture Injection
  • 06:05Electroporation
  • 06:45Knock-Out Efficiency Assessment
  • 07:25Results: Representative Knock-Out Effects in Axolotl Spinal Cord Neural Stem Cells
  • 08:33Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Presentato qui è un protocollo per eseguire il knock-out genico limitato nel tempo e nello spazio nei midollo spinale axolotl iniettando il complesso CAS9-gRNA nel canale centrale del midollo spinale seguito dall'elettroporazione.

Tags

AxolotlSpinal CordNeural Stem CellsGene Knock-outElectroporationCAS9GRNARegenerationMolecular MechanismsNeural Stem Cell FunctionSpinal Cord InjuryAgarose Electroporation PlatePoring PulseTransfer Pulse

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