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Producing Gene Deletions in Escherichia coli by P1 Transduction with Excisable Antibiotic Resistance Cassettes

Produzindo a deleção do Gene na Escherichia coli por transdução P1 com fitas de resistência aos antibióticos sujeitos

DOI:
10.3791/58267-v

•

08:13 min

•

September 01, 2018

•

, ,
1Evolution and Genetics, Department of Biosciences,University of Oslo

Capítulos

  • 00:04Título
  • 00:28Phage Lysate Preparation
  • 02:31P1 Transduction
  • 04:30Kanamycin (Kan) Cassette Excision
  • 06:03Results: TAA Expression by a tamA Deletion Strain
  • 07:38Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Aqui nós apresentamos um protocolo para o uso de construções de exclusão de resistência aos antibióticos-gaveta pré-existente, como uma base para a tomada de mutantes de exclusão em outras estirpes de Escherichia coli . Tais mutações de exclusão podem ser mobilizadas e inseridas o locus correspondente de uma estirpe de destinatário usando transdução de bacteriófago P1.

Tags

P1 TransductionGene DeletionEscherichia ColiAntibiotic Resistance CassetteKnockout MutantPhageBacterial CultureLysogeny BrothCentrifugationChloroformSodium Citrate

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