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Génération des vecteurs recombinants Avian Herpesvirus avec CRISPR/Cas9 gène édition
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Generating Recombinant Avian Herpesvirus Vectors with CRISPR/Cas9 Gene Editing
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Génération des vecteurs recombinants Avian Herpesvirus avec CRISPR/Cas9 gène édition

DOI:
10.3791/58193-v

•

12:21 min

•

January 07, 2019

•

, , , , , , , ,
1The Pirbright Institute & UK-China Centre of Excellence for Research on Avian Diseases, 2Binzhou Animal Science and Veterinary Medicine Academy & UK-China Centre of Excellence for Research on Avian Diseases

Capítulos

  • 00:04Título
  • 00:53CRISPR/Cas9-mediated Knock-in: Transfection and Infection
  • 02:14Harvesting and Purification of the HVT Recombinant Virus
  • 05:38Excision of the Fluorescent Reporter Gene via the Cre-lox System
  • 06:23Plaque Purification
  • 07:31Verification of the Recombinant HVT
  • 09:31Stability of the Recombinant Virus
  • 10:36Results: Analysis of the Generated Recombinant Avian Herpesvirus Vectors
  • 11:38Conclusion

Summary

Tadução automática

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HERPESVIRUS de dindons et dindes (HVT) est largement utilisé comme une plateforme de vecteur pour la génération de vaccins recombinants contre un certain nombre de maladies aviaires. Cet article décrit une méthode simple et rapide pour la génération de vaccins recombinants HVT-guidé à l’aide d’un NHEJ-CRISPR/Cas9 intégré et système de Cre-Lox.

Tags

CRISPR/Cas9Recombinant Avian HerpesvirusViral AntigensHVT GenomeRecombinant VaccinesGFP Expression CassetteCre-LoxP SystemCell SortingChick Embryo FibroblastsTransfectionHVT Virus StockPlaque Forming UnitsTrypsin-EDTACell SuspensionCell DensityCell SorterGFP-expressing Cells

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