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An Optical Assay for Synaptic Vesicle Recycling in Cultured Neurons Overexpressing Presynaptic Proteins
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Un test ottico per riciclo delle vescicole sinaptiche in colture di neuroni che Overexpressing proteine presinaptiche

DOI:
10.3791/58043-v

•

09:33 min

•

June 26, 2018

•

, , ,
1Institute for Anatomy and Embryology,University Medical Centre Göttingen

Capítulos

  • 00:04Título
  • 00:31Transfection
  • 03:52Stimulation and Syt1 Uptake
  • 05:39Immunocytochemistry
  • 07:17Results: GFP-Rogdi at Functional Synapses
  • 08:42Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Descriviamo un test ottico per vescicole sinaptiche (SV) riciclaggio in colture di neuroni. Combinando questo protocollo con doppia transfezione di esprimere un marcatore presinaptica e la proteina di interesse ci permette di individuare siti presinaptici, loro delle vescicole sinaptiche capacità di riciclaggio e di determinare il ruolo della proteina di interesse.

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Keywords: Optical AssaySynaptic Vesicle RecyclingCultured NeuronsPresynaptic ProteinsAntibody SpecificityPrimary Hippocampal CellsTransfectionCalcium ChlorideEndotoxin-free DNATransfection BufferReduced-serum MediumCell-culture MediumIncubationWashingActive Synapses

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