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네이티브, 태그 Huntingtin Exon1 모노 머와 스모 융합 전략을 사용 하 여 소의 생성

JoVE Journal
Bioquímica

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JoVE Journal Bioquímica

Generation of Native, Untagged Huntingtin Exon1 Monomer and Fibrils Using a SUMO Fusion Strategy

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네이티브, 태그 Huntingtin Exon1 모노 머와 스모 융합 전략을 사용 하 여 소의 생성

DOI:

10.3791/57506-v

•

11:22 min

•

June 27, 2018

•

Andreas Reif, Anass Chiki, Jonathan Ricci, Hilal A. Lashuel

¹Laboratory of Molecular and Chemical Biology of Neurodegeneration,Ecole Polytechnique Fédérale de Lausanne (EPFL)

Capítulos

00:04Título
00:53Cell Lysis and Purification of His6-SUMO Httex1 Fusion Protein by Immobilized Metal Affinity Chromatography (IMAC)
02:56Cleavage of the His6-SUMO-tag and HPLC Purification
06:06Disaggregation and Resolubilization of Httex1 Proteins
07:53Results: Characterization of Native, Untagged Huntingtin Exon1 Monomer and Fibrils Prepared via SUMO Fusion
09:52Conclusion

Summary

Tadução automática

여기, 우리가 현재 네이티브, 태그 무료 단위체의 밀리 그램 수량과 작은 유비퀴틴 관련된 한정자 (스모) 과도 융합에 따라 Huntingtin 단백질 (Httex1)의 exon1의 소의 생산을 위한 강력 하 고 최적화 된 프로토콜.

Tags

Keywords: Native Huntingtin Exon1 SUMO Fusion Strategy SDS-PAGE Analysis IMAC Purification HPLC Purification DTT L-cysteine Trifluoroacetic Acid Aggregation-prone Proteins Amyloid-beta Alpha-synuclein

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