Journal
/
Bioquímica
/
Generatie van eigen, niet-gecodeerde Huntingtin Exon1 monomeer en fibrillen met behulp van een SUMO Fusion strategie
JoVE Journal
Bioquímica
This content is Free Access.
JoVE Journal Bioquímica
Generation of Native, Untagged Huntingtin Exon1 Monomer and Fibrils Using a SUMO Fusion Strategy
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Generatie van eigen, niet-gecodeerde Huntingtin Exon1 monomeer en fibrillen met behulp van een SUMO Fusion strategie

DOI:
10.3791/57506-v

•

11:22 min

•

June 27, 2018

•

, , ,
1Laboratory of Molecular and Chemical Biology of Neurodegeneration,Ecole Polytechnique Fédérale de Lausanne (EPFL)

Capítulos

  • 00:04Título
  • 00:53Cell Lysis and Purification of His6-SUMO Httex1 Fusion Protein by Immobilized Metal Affinity Chromatography (IMAC)
  • 02:56Cleavage of the His6-SUMO-tag and HPLC Purification
  • 06:06Disaggregation and Resolubilization of Httex1 Proteins
  • 07:53Results: Characterization of Native, Untagged Huntingtin Exon1 Monomer and Fibrils Prepared via SUMO Fusion
  • 09:52Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Hier presenteren we een robuust en geoptimaliseerde protocol voor de productie van milligram hoeveelheden native, tag-vrije monomeren en fibrillen van de exon1 van het eiwit Huntingtin (Httex1) op basis van de voorbijgaande fusie van kleine ubiquitin verwante modifier (SUMO).

Tags

Keywords: Native Huntingtin Exon1SUMO Fusion StrategySDS-PAGE AnalysisIMAC PurificationHPLC PurificationDTTL-cysteineTrifluoroacetic AcidAggregation-prone ProteinsAmyloid-betaAlpha-synuclein

Article

Embed

ADICIONAR À PLAYLIST

Usage Statistics

Vídeos Relacionados

check_url/pt/57506?article_type=v

Identificatie van kleine synthetische molecules bindende eiwitten in een Inheemse cellulaire omgeving door live-cell fotoaffiniteitslabeling
check_url/pt/57506?article_type=v

Het oplossen van Affiniteit gezuiverde eiwit complexen door Blue inheemse PAGE en Protein Correlatie Profiling
check_url/pt/57506?article_type=v

Analyse van supercomplexen van de Mitochondrial Electron Transport Chain met Native Electrophoresis, In-gel Assays, en Electroelution
check_url/pt/57506?article_type=v

Fractionering voor oplossing van oplosbare en onoplosbare Huntingtin soorten
check_url/pt/57506?article_type=v

Vastleggen en identificatie van RNA-bindende proteïnen met behulp van klik chemie-bijgewoonde RNA-interactome vangen (CARIC) strategie
check_url/pt/57506?article_type=v

Gebruik van recombinante Fusion eiwitten in een fluorescerende Protease Assay Platform en hun In-gel renaturatie
check_url/pt/57506?article_type=v

Een strategie om verbindingen te identificeren die van invloed zijn op de celgroei en overleving in gekweekte zoogdiercellen bij een lage tot matige doorvoer
check_url/pt/57506?article_type=v

Lokalisatie van SUMO-gemodificeerde eiwitten met behulp van fluorescerende Sumo-trapping eiwitten
check_url/pt/57506?article_type=v

Interacties met en membraan Permeabilization van de mitochondriën van de hersenen door amyloid fibrils
check_url/pt/57506?article_type=v

SUMO-bindende entiteiten (SUBEs) als hulpmiddelen voor de verrijking, isolatie, identificatie en karakterisering van de SUMO proteome in leverkanker

Read Article