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Utilizando um sistema de enriquecimento de imunoprecipitação abrangente para identificar um perfil endógena modificação pós-traducional de proteínas alvo
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Bioquímica
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JoVE Journal Bioquímica
Utilizing a Comprehensive Immunoprecipitation Enrichment System to Identify an Endogenous Post-translational Modification Profile for Target Proteins

Utilizando um sistema de enriquecimento de imunoprecipitação abrangente para identificar um perfil endógena modificação pós-traducional de proteínas alvo

DOI:
10.3791/56912-v

•

08:12 min

•

January 08, 2018

•

, ,
1R&D Department,Cytoskeleton Inc.

Capítulos

  • 00:05Título
  • 00:59Sample Preparation: Cell Culture
  • 02:56Immunoprecipitation (IP) Assay
  • 07:00Results: Sample Preparation and IP Enrichment for PTM Detection and Crosstalk Investigation
  • 07:43Conclusion

Summary

Tadução automática

Tadução automática

Investigando várias, modificações borne-translational endógenas para uma proteína do alvo podem ser extremamente desafiadoras. Técnicas descritas aqui utilizam um sistema de buffer e filtro de Lise otimizado desenvolvido com PTM-direcionamento específico, matrizes de afinidade para detectar as modificações fosforilação acetilação, ubiquitination, SUMOylation 2/3 e tirosina para um destino proteína, usando um sistema único e simplificado.

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Keywords: ImmunoprecipitationPTMPost-translational ModificationCell SignalingLysateBlaster FilterProtein QuantitationA431 CellsLysis BufferDNA Removal

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