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Estudos de estrutura e função em células-tronco embrionárias de camundongos usando troca de cassete mediada por recombinase
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1Department of Biomedical Molecular Biology,Ghent University, 2Inflammation Research Center,VIB, 3Center for Medical Genetics,Ghent University Hospital, 4Cancer Research Institute Ghent (CRIG), 5Department of Basic Medical Sciences, Faculty of Medicine and Health Sciences,Ghent University, 6Helmholtz Center for Infection Research, 7Mammalian Functional Genetics Laboratory, Division of Blood Cancers, Australian Centre for Blood Diseases, Department of Clinical Haematology,Monash University and Alfred Health Alfred Centre
Capítulos
- 00:05Título
- 01:11The RMCE Principle
- 02:15Isolation of RMCE-compatible Knockout Mouse ES Cells
- 05:22Isolate RMCE-compatible Knockout ES Cells
- 07:29Generation of an RMCE-compatible Targeting Vector Using Recombination Cloning
- 09:25RMCE-mediated ES Cell Targeting of Rescue Constructs to the R26 Locus and Differentiation of ES Cells in Embryoid Bodies
- 12:41Results: Cystic EB Formation Using Recombinase Mediated Cassette Exchange
- 14:27Conclusion
Proteínas, muitas vezes contêm vários domínios que podem exercer diferentes funções celulares. Gene knock-out (KO) não consideram essa diversidade funcional. Aqui, relatamos uma abordagem de estrutura-função com base na troca de cassete mediada por recombinação (RMCE) em KO células estaminais embrionárias que permite a dissecação molecular de vários domínios funcionais ou variantes de uma proteína.
