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Cryomilled哺乳動物細胞からのタンパク質複合体の親和性のキャプチャ

JoVE Journal
Bioquímica

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JoVE Journal Bioquímica

Protein Complex Affinity Capture from Cryomilled Mammalian Cells

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Cryomilled哺乳動物細胞からのタンパク質複合体の親和性のキャプチャ

DOI:

10.3791/54518-v

•

10:37 min

•

December 09, 2016

•

John LaCava², Hua Jiang, Michael P. Rout

¹Laboratory of Cellular and Structural Biology,The Rockefeller University, ²Institute for Systems Genetics, Department of Biochemistry and Molecular Pharmacology,New York University School of Medicine

Capítulos

00:05Título
00:30Cell Harvesting and Freezing
03:09Cryogenic Disruption of Frozen Cells
04:50Affinity Capture of Protein Complexes from Cell Extracts
06:02Affinity Capture
07:41Results: Comparing Some Different Aspects of Affinity Capture Optimization
09:38Conclusion

Summary

Tadução automática

ここでは、極低温固体ミリングによって、哺乳動物細胞を破壊し、得られた細胞粉末から細胞抽出物を生成し、そして抗体結合ミクロンスケールの常磁性ビーズ上にアフィニティー捕捉により、目的のタンパク質複合体を単離するためのプロトコルを説明します。

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Keywords: Protein Complex Affinity Capture Cryomilled Mammalian Cells Cell Biology Biologia Molecular Protein Interactions PBS Cell Pellet Liquid Nitrogen Cell Lysis

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