A estrutura complexa do sistema nervoso vertebrado surge de uma série complexa de eventos envolvendo diferenciação celular, migração celular e mudanças na morfologia celular. Estudar esses processos é essencial para nossa compreensão da função do sistema nervoso, bem como nossa capacidade de diagnosticar e tratar distúrbios que resultam do desenvolvimento anormal. No entanto, os tecidos neurais são relativamente inacessíveis para manipulações experimentais, especialmente em mamíferos embrionários. Como resultado, muitos cientistas aproveitam a cultura explant para estudar processos neurodesenvolvimentistas em um ambiente “organotípico”, o que significa que o tecido é removido do organismo, mas sua complexa arquitetura celular é mantida. Geralmente, as culturas de explant são criadas por dissecção cuidadosa do tecido neural que é então submerso em mídia de crescimento cuidadosamente projetada e cultivada in vitro.
Este vídeo fornecerá primeiro uma breve visão geral da cultura de explant neural, incluindo suas vantagens sobre outros métodos in vitro e considerações importantes para a manutenção do tecido saudável. Em seguida, um protocolo geral será fornecido para a criação de uma cultura explant do cérebro de camundongos embrionários, delineando o isolamento de embriões da mãe e dissecção do cérebro. A apresentação também inclui uma visão geral da cultura de fatias, na qual finas seções de tecido do sistema nervoso são geradas para melhorar o acesso visual às células em desenvolvimento. Por fim, algumas aplicações dessas técnicas serão fornecidas para demonstrar como elas podem ser usadas para responder a perguntas importantes no campo do neurodesenvolvimento.
Procedimento
Culturas explantas servem como técnica para investigar o desenvolvimento de populações celulares específicas e estruturas neurais. Em experimentos de neurociência de desenvolvimento, explantas são tecidos neurais excisados de um embrião para desenvolvimento contínuo in vitro. Essas culturas dão aos pesquisadores a capacidade de manipular e visualizar os tecidos em desenvolvimento de maneiras que não são possíveis in vivo. Este vídeo introduzirá alguns princípios importantes por trás do tr…